芪術(shù)藥對抗氧化協(xié)同機制的研究.pdf

1、傳統(tǒng)中草藥是我國功能食品的重要組成原料之一，已有幾千年的使用歷史。中草藥常以方劑配伍的形式應(yīng)用于功能食品中，很多中草藥在配伍使用時表現(xiàn)出比單獨使用更好的藥理功能。中藥藥對是復(fù)方的最小單位，是相對固定的兩味草藥的配伍形式，通常表現(xiàn)出藥效增加、互助、減弱、拮抗等作用。
　　 黃芪白術(shù)（芪術(shù)）藥對是醫(yī)家常用藥食兼用經(jīng)典藥對之一，在“芪術(shù)湯”和“補中益氣湯”等方中均有體現(xiàn)，具有輔助治療腎病、糖尿病等慢性疾病的作用。本文主要研究了芪術(shù)藥對

2、配伍前后乙醇提取物抗氧化能力和物質(zhì)基礎(chǔ)變化；研究了芪術(shù)藥對配伍前后揮發(fā)油抗氧化活性、抑菌能力和化學(xué)成分的變化。
　　 芪術(shù)藥對乙醇提取物體外抗氧化實驗（清除ABTS·+自由基能力和總抗氧化能力FRAP）結(jié)果表明，芪術(shù)藥對配伍之后乙醇提取物存在抗氧化協(xié)同效應(yīng)。芪術(shù)藥對乙醇提取物物質(zhì)基礎(chǔ)的分析、鑒定采用HPLC-DAD-MS/MS聯(lián)用技術(shù)，通過HPLC技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)芪術(shù)藥對乙醇提取物中有31個化合物，采用HPLC-DAD-MS/MS聯(lián)

3、用技術(shù)初步鑒定了其中的16個化合物。芪術(shù)藥對乙醇提取物中潛在抗氧化成分的篩選、鑒定采用HPLC-DPPH方法。結(jié)果表明，芪術(shù)藥對乙醇提取物中潛在抗氧化成分有11個，根據(jù)其UVλmax，MS，和/或MS/MS數(shù)據(jù)，初步鑒定出8個化合物，分別為：Ononin，9，10-dimethoxy-pterocarpan-3-O-β-D-glycoside，Claycosin，3’-hydroxy-5'-methoxyisoflavone-7-O-β

4、-D-glueopyranoside，F(xiàn)ormononetin，AtractylenolideⅡ，AtractylenolideⅥ和Daucosterol。芪術(shù)藥對配伍之后潛在抗氧化成分相對濃度比率分析顯示，配伍之后Ononin和Claycosin相對濃度比率顯著減?。≒<0.05），而component6，F(xiàn)ormononetin和AtractylenolideⅥ相對濃度比率顯著增大（P<0.05）。外標(biāo)法對Formononetin和

5、Ononin的定量結(jié)果顯示，配伍之后Formononetin濃度顯著增大（P<0.05），而Ononin濃度顯著減?。≒<0.05）。配伍之后這些潛在抗氧化成分濃度變化或許是引起芪術(shù)藥對乙醇提取物抗氧化活性增強的一個原因；另外，配伍過程中黃酮苷的水解可能是引起抗氧化活性增強的另外一個原因。
　　 芪術(shù)藥對揮發(fā)油體外抗氧化實驗（清除DPPH自由基和ABTS·+自由基）和抑菌能力（抑制E.coli、M.luteus、B.subtil

6、is、S.aureus、C.albicans、A.niger和H.anomala）結(jié)果表明，芪術(shù)藥對配伍后揮發(fā)油在抗氧化能力和抑菌能力方面存在明顯的協(xié)同作用。通過GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析了芪術(shù)藥對配伍前后揮發(fā)油物質(zhì)基礎(chǔ)變化。結(jié)果顯示，芪術(shù)藥對揮發(fā)油物質(zhì)基礎(chǔ)不僅僅是兩味藥的簡單加和：其中33個化合物來自白術(shù)，8個化合物來自黃芪，并且新檢測到2個化合物：1，2，3，4，4a，5，6，8a-Octahydro-α，α，4a，8-tetramet

7、hyl-[2R-（2α，4aα，8aβ）]-2-naphthalenemethanol和Neoclovene oxide。芪術(shù)藥對揮發(fā)油中潛在活性物質(zhì)的篩選采用主成分回歸（PCR）的方法。結(jié)果顯示，有15個化合物對實驗菌株（E.coli、M.luteus、B.subtilis、S.aureus、C.albicans、A.niger、和H.anomala）的抑制和清除DPPH和ABTS·+自由基有重要貢獻；另外還有8個化合物可能具有顯著清