DSBs修復(fù)基因XRCC4多態(tài)性及環(huán)境暴露因素與肺癌關(guān)聯(lián)性的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 探討影響肺癌發(fā)病的主要危險(xiǎn)因素，研究DNA雙鏈斷裂(DNA double-strandbreaks，DSBs)修復(fù)基因XRCC4多態(tài)性及環(huán)境暴露因素單獨(dú)或聯(lián)合作用與肺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)，為肺癌的預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。
　　 方法：
　　 (1)采用病例-對照研究設(shè)計(jì)。781例肺癌病例為2006年12月至2010年1月福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、協(xié)和醫(yī)院、南京軍區(qū)福州總醫(yī)院經(jīng)組織病理學(xué)確診的新發(fā)病例。781例

2、健康對照為按性別、年齡(±3歲)進(jìn)行頻數(shù)匹配的醫(yī)院探訪人群和社區(qū)人群。對每位研究對象進(jìn)行面對面的問卷調(diào)查。每位病例采集5ml血樣；每位對照收集一份唾液或漱口水樣本，唾液采用oragene唾液收集器收集，室溫保存，漱口水保存于4℃冰箱，并進(jìn)行DNA抽提。
　　 (2)應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(polymerase chainreaction-restricted fragment long polymorphism；

3、PCR-RFLP)技術(shù)和TaqMan探針基因分型技術(shù)對入選樣本進(jìn)行基因多態(tài)性的檢測。
　　 (3)結(jié)合PCR擴(kuò)增和定點(diǎn)突變技術(shù)，分別構(gòu)建含有rs6869366位點(diǎn)不同等位基因的XRCC4基因啟動(dòng)子，以雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)檢測SNP位點(diǎn)堿基突變對啟動(dòng)子活性的影響。
　　 (4)采用EpiData3.1軟件錄入數(shù)據(jù)，運(yùn)用LDA軟件分析多個(gè)位點(diǎn)之間的連鎖不平衡關(guān)系，HAPLO.STAT軟件及PHASE2.1軟件進(jìn)行單體型推斷及分

4、析，其余統(tǒng)計(jì)應(yīng)用SPSS15.0軟件完成。
　　 結(jié)果：
　　 1、肺癌危險(xiǎn)因素有：居住地周圍有污染企業(yè)、通風(fēng)不良、烹調(diào)油煙、使用糧柜存儲(chǔ)糧食、吸煙(＞30包年)、被動(dòng)吸煙(包括家庭和工作場所被動(dòng)吸煙)、肺部手術(shù)史、裝修后有刺激性氣味、使用農(nóng)藥、性格內(nèi)向；肺癌保護(hù)因素有：常食新鮮水果(＞3次-周)、飲淡茶、工作體力強(qiáng)度適中、常以散步作為鍛煉(10年前)。
　　 2、XRCC4 rs6869366含G等位基因的基因

5、型(T/G+G/G)顯著增加肺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)，未發(fā)現(xiàn)rs3734091、rsl056503基因多態(tài)性與肺癌易感性關(guān)聯(lián)。
　　 3、rs6869366與rs3734091存在連鎖不平衡，單體型推斷分析顯示，以Hapl-TC作為參照，Hap3-GC顯著增加肺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)，OR及其95％CI為1.993(1.194，3.329)。雙單體型推斷分析顯示，以TC/TC單體型對作為參照，攜帶TC/GC單體型對顯著增加肺癌的患病風(fēng)險(xiǎn)，其患病風(fēng)險(xiǎn)