紅松多酚分離鑒定及對(duì)輻射誘導(dǎo)氧化傷害的防護(hù)作用.pdf

1、紅松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc)，主要是產(chǎn)于黑龍江省中北部小興安嶺的珍貴樹(shù)種。紅松中含有大量的酚類(lèi)化合物，包括萜類(lèi)、多酚類(lèi)、生物堿等多種生物活性成分，具有抗輻射、抗氧化等多種生物學(xué)功能。本研究以小興安嶺的紅松為實(shí)驗(yàn)原料，系統(tǒng)地研究了紅松中的多酚組成和有效成分的抗氧化及抗輻射生物活性。采用乙醇作為紅松多酚的萃取溶劑，并且研究了紅松中的有效成分的提取工藝，優(yōu)化了最佳提取工藝條件。用大孔樹(shù)脂 AB-8純化紅松

2、多酚，利用不同梯度乙醇洗脫出來(lái)的紅松多酚從清除自由基、鐵離子螯合能力以及總還原能力等體外抗氧化指標(biāo)研究了紅松提取物的抗氧化活性。本實(shí)驗(yàn)采用生物活性跟蹤方法，通過(guò)體外抗氧化性篩選出生物活性較強(qiáng)組分進(jìn)行人體外周血白細(xì)胞和動(dòng)物抗輻射實(shí)驗(yàn)，并且利用半制備液相色譜技術(shù)二級(jí)純化紅松多酚，最后用高效液相色譜鑒定紅松提取物中的多酚組分。本研究的主要內(nèi)容如下：
　　(1)紅松多酚萃取溶劑的篩選，選取了甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和水五種溶劑萃取紅松多

3、酚，其中乙醇提取物得率高達(dá)到7.78mg/g，確定乙醇作為萃取溶劑。
　　(2)采用超聲波法提取紅松中的多酚成分，通過(guò)單因素試驗(yàn)確定影響多酚得率的因素及條件，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合響應(yīng)面方法優(yōu)化提取工藝，在固定超聲功率160W前提下，得到最佳提取工藝條件為超聲時(shí)間30.61min、料液比1:30.79和乙醇濃度42.20％。響應(yīng)面模型在此條件下紅松多酚提取率為8.241mg/g。
　　(3)本實(shí)驗(yàn)采用生物活性跟蹤方法，用

4、 AB-8大孔樹(shù)脂一級(jí)純化紅松多酚，乙醇作為洗脫劑，得到20％，40％，60％不同濃度的乙醇洗脫物，冷凍干燥成紅松多酚粉末。通過(guò)體外的生物活性指標(biāo)包括羥基自由基(·OH)、超氧陰離子(O2－·)、ABTS自由基和 DPPH自由基，鐵離子螯合能力以及總還原能力考察生物活性比較強(qiáng)的組分，結(jié)果40％的乙醇洗脫物的生物活性要明顯高于其它組分。
　　(4)用半制備液相色譜技術(shù)二級(jí)純化40％的乙醇洗脫物，得到高純度的紅松多酚，然后用高效液相色

5、譜對(duì)其多酚組分進(jìn)行分析，結(jié)果多酚含量最多的是香豆酸（321.4±1.0mg/100g)、水楊酸(117.7±3.1mg/100g)和香草酸（101.3±2.8mg/100g），其次是咖啡酸（54.2±3.2mg/100g)和兒茶素（25.3±1.9mg/100g)，含量最少的成分是黃芩苷(8.05±1.2mg/100g)。
　　(5)當(dāng)人體外周血白細(xì)胞受到電離輻射之后，不同劑量組的紅松多酚對(duì)白細(xì)胞數(shù)量的影響明顯要高于輻射對(duì)照組，出