中藥水提物對(duì)痤瘡丙酸桿菌體外抑制作用及對(duì)兔耳痤瘡模型的療效研究.pdf

1、 目的：分別提取十九種中藥的水提物,觀察其對(duì)痤瘡丙酸桿菌標(biāo)準(zhǔn)株及臨床株的體外抑制作用,從中篩選出對(duì)痤瘡丙酸桿菌具有體外抑制作用的中藥水提物,并將篩選出的藥物外用于兔耳痤瘡模型進(jìn)行療效及不良反應(yīng)觀察,從而為今后臨床上痤瘡的治療提供一些新的可供選擇的藥物。方法：1.采集痤瘡患者皮損內(nèi)容物,37°C厭氧培養(yǎng)48小時(shí)后,采用耐氧實(shí)驗(yàn)、革蘭氏染色鏡檢、觸媒實(shí)驗(yàn)、硝酸鹽實(shí)驗(yàn)、糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn)等系列生化實(shí)驗(yàn)以及ANI厭氧菌鑒定卡,VITEK全自動(dòng)微生物鑒

2、定儀鑒定為痤瘡丙酸桿菌。2.經(jīng)查閱文獻(xiàn)[3-4]后選擇臨床上使用頻率較高的19種中藥(黃柏、黃芩、大黃、金銀花、苦參、連翹、地膚子、白頭翁、百花蛇舌草、魚(yú)腥草、馬齒莧、旱蓮草、紫草、板藍(lán)根、大青葉、蒲公英、車前子、白芷、蛇床子)各 20g,分別加水浸泡、煎煮、過(guò)濾、濃縮配制成 20ml(相當(dāng)于原藥濃度1g/ml) 的中藥水提物。3.配制含不同濃度的19種中藥水提物的改良GAM培養(yǎng)平板,以瓊脂稀釋法檢測(cè)各種藥物的MIC,篩選出對(duì)痤瘡丙酸桿

3、菌有體外抑菌作用的中藥水提物；同時(shí)檢測(cè)臨床上治療痤瘡常用的4種抗生素的 MIC,以了解痤瘡丙酸桿菌的耐藥情況。4.選取健康雄性家兔(普通級(jí))7 只,采用 Kligman 法造模,將煤焦油外涂于兔耳的雙側(cè)耳管開(kāi)口2cm×2cm處,每日1次,連續(xù)2周,于造模第7天時(shí)皮下注射痤瘡丙酸桿菌菌懸液,濃度為 1.0×108CFU/ml,每側(cè)約 50ul。造模成功后以隨機(jī)分組方式將14只兔耳分為7組,每組2只,其中6組擦拭中藥水提物,第7組1只兔耳擦

4、拭夫西地酸乳膏,另1只擦拭生理鹽水進(jìn)行對(duì)照,每日1次,分別于第7天、第14天、第21天觀察其療效及不良反應(yīng)。結(jié)果：1.從80 例痤瘡患者皮損處分離培養(yǎng)并鑒定出痤瘡丙酸桿菌 27 例,陽(yáng)性率為33.75%,性別、年齡無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.黃柏、黃芩、大黃的MIC為25 mg/ml；金銀花、苦參的MIC為50 mg/ml；連翹的MIC為100 mg/ml；地膚子、白頭翁、百花蛇舌草、魚(yú)腥草、馬齒莧、旱蓮草、紫草、板藍(lán)根、大青葉、蒲公英、車前子、

5、白芷、蛇床子13味中藥在最高濃度200 mg/ml進(jìn)行測(cè)試時(shí)仍未產(chǎn)生抑菌作用。3.甲硝唑MIC50為16μg/ml,MIC90為128μg/ml,耐藥率為78.57%?？肆置顾豈IC50為4μg/ml, MIC90為16μg/ml,耐藥率為 28.57%。阿奇霉素 MIC50 為 2μg/ml,MIC90 為 8μg/ml,耐藥率為21.42%。羅紅霉素MIC50為 1μg/ml,MIC90為 64μg/ml,耐藥率為46.42%。4.

6、兔耳在涂煤焦油7天后,局部增厚,變硬,毛孔變粗大,毛囊口增大并開(kāi)放隆起,可見(jiàn)白色粉刺及黑色角栓。第14天時(shí)可見(jiàn)紅色炎性丘疹及少許膿皰。5.經(jīng)分別擦拭黃柏、黃芩、大黃、金銀花、苦參、連翹六種中藥水提物治療7天后的兔耳紅腫減輕,部分消退,14天后兔耳厚度變薄,柔軟度有所增加,21天后局部毛囊口角栓及丘疹、粉刺減少變平。未見(jiàn)紅斑、脫屑等不良反應(yīng)；外用夫西地酸乳膏治療后的兔耳紅腫消退,而擦拭生理鹽水的兔耳與治療前相比未見(jiàn)明顯變化。結(jié)論：1.黃柏