山茱萸總苷及多糖對實驗性心肌梗死大鼠的保護作用及機制探析.pdf

1、研究背景： 急性心肌梗死是指冠狀動脈急性閉塞，冠狀動脈供血急劇減少或中斷，使相應區(qū)域的心肌發(fā)生嚴重而持久的缺血，缺氧的病癥，臨床上死亡率高，是臨床危重疾病之一。西藥及介入治療的研究較多，而中醫(yī)中藥治療冠心病的研究主要集中在活血化瘀法及相關類藥物上。根據(jù)中醫(yī)對冠心病的認識，冠心病屬中醫(yī)胸痹、真心痛范疇。其病機為本虛標實，本虛主要包括氣、血、陰、陽之虛，標實則為瘀血、寒凝、痰濁、氣滯諸證。正如《黃帝內(nèi)經(jīng)》云：“腎虛者……虛則胸中痛。

2、”腎為人體先天之本，藏納腎精，主人體一身陰陽之根本。而心腎同屬少陰，經(jīng)絡相連，腎陽虛則心失溫煦，心陽不振，鼓動無力，血行遲緩，痹阻心脈；腎陰不足，則心失濡潤，滋生內(nèi)熱，營陰暗耗，脈絡空虛，血流滯澀，灼津為痰，閉阻脈絡，心脈不通，胸陽失展，發(fā)為胸痹。故依此理論，從補腎強心出發(fā)，在臨床上治療冠心病收到肯定療效，但目前對此深層次的機制研究尚不多。中藥山茱萸具有補益肝腎，澀精固脫的功效，是在補腎強心治法指導下的首選藥。本研究通過探討山茱萸對于急

3、性心肌梗死大鼠模型的心肌保護作用，為闡釋心腎相關理論的本質(zhì)提供實驗依據(jù)。 目的： 基于中醫(yī)對冠心病病因病機的認識，遵循補腎強心的基本治療原則，探討山茱萸單成分提取物山茱萸總苷及多糖對實驗性急性心肌梗死大鼠的保護作用及其機制，并比較預防給藥和治療給藥二者的療效區(qū)別，從氧化應激及炎癥反應兩方面探明作用機制，為臨床運用山茱萸治療冠心病提供實驗依據(jù)。 方法： 將60只SD大鼠，采用結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支(LAD

4、)的方法建立急性心肌梗死模型，術(shù)后24小時存活的38只隨機分為模型組，山茱萸總苷治療組，山茱萸多糖治療組，另外36只SD大鼠隨機分為兩部分，設為假手術(shù)組和預防給藥組，其中假手術(shù)組僅在冠脈相同部位穿線不結(jié)扎，其余四組均在相同部位結(jié)扎冠脈。各組設立相同的觀察起點和終點，均在第8天造模，術(shù)前或者術(shù)后給藥7天，總的觀察時間為15天。最終58只大鼠獲取完整資料，上述各組例數(shù)分別為10，12，12，12和12只。觀察結(jié)束后，每組隨機抽取一半的動物行

5、超聲心動圖及血流動力學檢測評價心功能，然后腹主動脈取血檢測血清MDA、SOD、MPO及GSH—Px含量，并同時留取心臟標本，行組織病理學檢測及Masson三色染色心肌梗死面積測定，免疫組化半定量分析心肌組織中的炎癥因子IL—6和IL-10的表達。每組剩下的半數(shù)動物留取活組織標本液氮保存以待后續(xù)實驗。 結(jié)果： 超聲心動圖與假手術(shù)組比，模型組左室收縮內(nèi)徑(LVDs)、左室舒張內(nèi)徑(LVDd)、左室收縮末容積(LVESV)、左

6、室舒張末容積(LVEDV)顯著增加(P<0.05)。而短軸縮短率(FS)及射血分數(shù)(EF)卻顯著下降(P<0.05)。山茱萸治療各組別均能顯著降低左室收縮內(nèi)徑、左室舒張內(nèi)徑及左室舒張末容積(P<0.05)，而僅有預防給藥組能顯著降低左室收縮末容積(P<0.05，與模型組比)。室間隔厚度，左室壁厚度在各組之間無顯著性差異(P>0.05)。 血流動力學與模型組比較，山茱萸各組的左室收縮壓(LVSP)顯著上升(P<0.05)；左室內(nèi)壓

7、最大下降速率(—dp/dt)、左室舒張末壓(LVEDP)顯著降低(P<0.05)；而心率及左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dt)與模型組的比較未見顯著性差異。 組織病理學及梗死面積假手術(shù)組心肌組織HE染色后可見肌束飽滿，胞漿呈現(xiàn)均勻紅色，細胞核呈現(xiàn)藍色，少量炎癥細胞浸潤。而模型組心肌組織HE染色后可見梗死區(qū)域呈現(xiàn)著色淡，心肌纖維細胞明顯減少，心肌纖維溶解，橫紋消失或斷裂，膠原間質(zhì)纖維增生明顯，梗死灶內(nèi)及周圍有大量炎癥細胞浸潤等。M

8、asson三色染色后，梗死的組織因間質(zhì)膠原纖維增多呈現(xiàn)綠色，定量分析顯示，與模型組比較，山茱萸各組能顯著縮小心肌梗死面積，分別是28.72±2.36、26.58±1.78、26.18±1.38 vs34.50±5.06(P<0.05)，且山茱萸各組心肌組織的HE染色可見心肌問質(zhì)增生減少，壞死減輕，炎性細胞浸潤減少。 血清生化標志物與模型組比較，山茱萸各組MDA含量顯著下降(P<0.05)，且山茱萸總苷和多糖的組間比較沒有差異；而

9、山茱萸各組能顯著升高SOD含量(P<0.05)，以多糖治療的效果最好；MPO的含量以模型組最高，經(jīng)山茱萸治療后，各治療組的MPO含量均顯著下降(P<0.05)，各成分的組間比較無顯著性差異(P>0.05)；而GSH—Px，與假手術(shù)組比較，模型組的含量顯著下降(P<0.05)，經(jīng)山茱萸各成分治療后，各組GSH—Px含量升高，且較模型組比較有顯著性差異(P<0.05)。 心肌組織炎癥因子免疫組化定位染色顯示，AMI后心肌組織炎性細胞

10、因子的表達主要位于梗死區(qū)域少量存活的心肌細胞以及梗死周邊區(qū)、非梗死區(qū)域心肌細胞的胞漿中。半定量分析結(jié)果顯示，假手術(shù)組可見心肌組織炎癥因子IL—6、IL-10表達下降，而與之相比模型組IL—6和IL—IO的表達都不同程度地上升，經(jīng)山茱萸各成分治療后，炎癥因子IL—6的表達有所下降，而山茱萸多糖可顯著升高IL-10的表達(P<0.05)。 結(jié)論： 1.山茱萸各成分可以改善急性心肌梗死后心功能； 2.山茱萸各成分可顯著