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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究ω-3 不飽和脂肪酸對(duì)鼠視網(wǎng)膜新生血管的作用。
方法:選取出生后7日健康清潔級(jí)新生Wistar白鼠32只,雌雄不限,分為A、B、C、D4組,每組各8只,分別與母鼠共同飼養(yǎng),四組實(shí)驗(yàn)鼠在空氣中喂養(yǎng)5日后將12日齡鼠與母鼠取出,均置于氧氣含量為75%±2%的密閉孵育箱中,每天將母鼠取出1次,每次正常環(huán)境中飼養(yǎng)3小時(shí),5日后將12日齡小鼠取出,放置空氣中喂養(yǎng)至17日齡,即制備出新生鼠早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變動(dòng)物模型。其中A組為
2、ROP模型對(duì)照組,B、C、D組分別小劑量治療組、中劑量治療組及大劑量治療組,分別給予不同劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng),按母鼠公斤體重給與ω-3PUFAs 2.5mg/kg/d、7.5mg/kg/d及15mg/kg/d喂養(yǎng)。手術(shù)顯微鏡下摘除小鼠視網(wǎng)膜,采用免疫組化觀察小鼠中突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜CD31的特異性表達(dá),Western印跡法檢測(cè)視網(wǎng)膜標(biāo)本中RGS5的表達(dá)。
結(jié)果:免疫組化觀察各組樣本鼠新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜數(shù),
3、A組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)為(17.00±3.42)個(gè)、B組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)為(15.63±2.67)個(gè)、C組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)為(9.13±1.96)個(gè)、D組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)為(8.38±2.19)個(gè);其中模型組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)高于ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,小劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞核數(shù)高于大劑量ω-
4、3PUFAs喂養(yǎng)組。A組與C組、A組與D組比較差異均有顯著意義((P<0.001),其中A、B組相比較;C、D組相比較差異無(wú)顯著意義(P>0.05)。
免疫印跡法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組視網(wǎng)膜RGS5的表達(dá):A組RGS5/β-Actin 值為(0.24±0.96)、B組RGS5/β-Actin 值為(0.36±0.08)、C組RGS5/β-Actin 值為(0.51±0.23)、D組RGS5/β-Actin 值為(0.66±0.19)
5、。其中模型組RGS5/β-Actin 值低于ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,小劑量RGS5/β-Actin 值低于中劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,中劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組略低于高劑量ω-3PUFAs喂養(yǎng)組,A組與C組、A組與D組比較差異均有顯著意義((P<0.001),其中A、B組相比較;C、D組相比較差異無(wú)顯著意義(P>0.05)。
結(jié)論:RGS5表達(dá)并介導(dǎo)鼠視網(wǎng)膜新生血管疾病的病理過(guò)程,方差分析顯示給予一定劑量的ω-3 不飽
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