熒光原位雜交(FISH)用于檢測乳腺癌患者Her-2-neu擴增情況的研究.pdf

1、目的：采用FISH檢測Her—2/neu基因在乳腺癌患者中擴增的情況，并比較FISH檢測方法和IHC檢測方法的差異性和相關(guān)性，找到兩種檢測方法的最佳結(jié)合方式。同時分別分析比較免疫組化法(IHC)和熒光原位雜交法(FISH)檢測Her—2/neu情況與激素受體ER，PR，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法：①76例乳腺癌組織標(biāo)本均由中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院2007年～2008年乳腺癌患者術(shù)后的石蠟組織塊隨機抽取.所有病例術(shù)前均未行術(shù)前化療，放療

2、以及內(nèi)分泌治療，所有標(biāo)本均連續(xù)切片4um，經(jīng)HE染色病理確診為乳腺癌組織排除調(diào)取的為無轉(zhuǎn)移癌的淋巴結(jié)，滿足以上條件方可入選。本實驗所用乳腺癌Her—2/neu DNA探針試劑盒購自北京金菩嘉醫(yī)療科技有限公司，應(yīng)用熒光原位雜交技術(shù)檢測乳腺癌Her2/neu基因的擴增情況。②回顧性分析7.6例乳腺癌病例的臨床資料，包括患者的年齡，TNM分期，ER，PR，免疫組化法檢測的Her—2/neu蛋白表達(dá)情況。先比較熒光原位雜交法(FISH)和免疫組

3、化法(IHC)所得結(jié)果的差異性和相關(guān)性，找到兩種檢測方法的最佳結(jié)合方式。然后分別分析比較免疫組化法(IHC)和熒光原位雜交法(FISH)檢測Her—2/neu狀態(tài)與激素受體ER，PR，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。實驗結(jié)果應(yīng)用X2檢驗以及SPSS軟件包中進(jìn)行分析，以P<0.05作為有顯著性意義的標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果：⑴IHC陽性(+++)行FISH檢測后陽性符合率90.0％(17/19例)；IHC陰性(+)和(一)與FISH陰性符合率95.2％(4

4、0/42)；而IHC可疑陽性(++)與FISH陽性符合率20.0％(2/12例)，即IHC(++)者與FISH結(jié)果的一致性較差，但總的來看，IHC與FISH結(jié)果的總符合率86.4％(19/22例)，兩種方法呈明顯正關(guān)聯(lián)性(P<0.001)。⑵FISH法HER2/neu基因擴增率在ER，PR陰性組(48，1％，48.0％)高于ER，PR陽性組(18.4％，19.6％)，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組HER2/neu基因擴增率(42.3％)高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移

5、組(22.0％)；FISH法HER2/neu基因擴增與ER，PR表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(兩者均P＜0.05)，與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移率無明顯相關(guān)性(P=0.067＞0.05)。⑶IHC法HER2/neu蛋白表達(dá)率在ER，PR陰性組(74.1％，64.0％)明顯高于ER陽性組(28.6％，35.3％)，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組HER2/neu蛋白表達(dá)率(61.5％)高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組(36.0％)。IHC法HER2/neu基因擴增與ER，PR表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(兩者均P＜

6、0.05)；IHC法HER2/neu蛋白表達(dá)與淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移率呈顯著的正相關(guān)(P＜0.05)。 結(jié)論：①免疫組化法(IHC)是檢測HER2/neu狀態(tài)的首選方法，熒光原位雜交(FISH)在檢測HER2/neu狀態(tài)方面與IHC有良好的一致性，但對于IHC(++)與熒光原位雜交(FISH)檢測HER2/neu狀態(tài)一致性較差，對這類患者應(yīng)加做FISH。②基于IHC和FISH兩種方法檢測的HER2/neu狀態(tài)與ER，PR以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相