缺氧對(duì)于大鼠原代支持細(xì)胞的損傷作用和機(jī)制研究.pdf

1、目的:建立睪丸支持細(xì)胞體外缺氧模型,研究缺氧對(duì)于雄性生殖系統(tǒng)中支持細(xì)胞的活性和功能的影響,在此基礎(chǔ)之上進(jìn)一步探討產(chǎn)生活性和功能影響的可能機(jī)制,并尋找能夠減緩缺氧損傷的保護(hù)劑。
　　方法:在睪丸支持細(xì)胞體外缺氧模型的基礎(chǔ)之上,利用CoCl2作為體外缺氧模型的模擬劑。模擬支持細(xì)胞的缺氧環(huán)境,采用MTT和流式細(xì)胞儀檢測(cè)缺氧狀態(tài)下支持細(xì)胞的活性和凋亡率。并利用CoCl2模擬不同濃度下的支持細(xì)胞活性變化,檢測(cè)細(xì)胞活性是否存在劑量依賴性和時(shí)間

2、依賴性。利用實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)支持細(xì)胞凋亡情況,Westernblot檢測(cè)凋亡效應(yīng)分子caspase-3的變化。Real-timePCR檢測(cè)支持細(xì)胞的分泌功能。
　　結(jié)果:成功建立體外缺氧模型,支持細(xì)胞形態(tài)改變,細(xì)胞發(fā)生皺縮,體積縮小。發(fā)現(xiàn)CoCl2誘導(dǎo)缺氧能降低支持細(xì)胞活性存在濃度依賴性,但是不具備時(shí)間依賴性。同樣對(duì)于支持細(xì)胞凋亡也存在濃度依賴性,而且也具備時(shí)間依賴性。CoCl2誘導(dǎo)缺氧能夠通過(guò)氧化應(yīng)激引起依賴線粒體的凋亡途