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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文氯化鑭對原代大鼠星形膠質(zhì)細胞毒性作用機制研究姓名:魯帥申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):衛(wèi)生毒理學(xué)指導(dǎo)教師:蔡原20090401實驗分組將LaCl3用無血清的DMEM配制,使終濃度分別為025,05,10,20mmol/L,對照組使用無血清DMEM。研究方法l、大鼠星形膠質(zhì)細胞的原代培養(yǎng)及其免疫細胞化學(xué)法鑒定2、MTT法測定氯化鑭對星形膠質(zhì)細胞增殖能力的影響3、熒光探針法測定氯化鑭對細胞內(nèi)【ca2]i的影響4、流式細胞儀法
2、測定氯化鑭對線粒體膜電位的影響5、化學(xué)比色法測定氯化鑭對線粒體和胞漿中細胞色素C含量的影響6、流式細胞儀法測定氯化鑭對細胞凋亡的影響7、流式細胞儀法測定氯化鑭對細胞周期的影響8、倒置顯微鏡下觀察星形膠質(zhì)細胞形態(tài)學(xué)變化結(jié)果1、免疫細胞化學(xué)法鑒定星形膠質(zhì)細胞結(jié)果GFAP免疫組化完全后,鏡下可見絕大部分細胞胞漿被染成棕黃色,在倒置顯微鏡下每張玻片選擇10個視野,計數(shù)陽性細胞所占比例,陽性率可達90%以上,因此可將此原代培養(yǎng)的細胞作為星形膠質(zhì)細
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