丁苯酞上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子發(fā)揮抗缺氧損傷作用的機(jī)制研究.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文丁苯酞上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子發(fā)揮抗缺氧損傷作用的機(jī)制研究姓名：張波申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：李玲20080514丁苯酞上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞缺氧誘導(dǎo)因子發(fā)揮抗缺氧損傷作用的機(jī)制研究生率，而且它能顯著增加腦內(nèi)血管數(shù)量，并改善血管結(jié)構(gòu)的變化。雖然既往所有的實(shí)驗(yàn)都能看到NBP各種各樣的保護(hù)作用，但其發(fā)揮保護(hù)作用的具體機(jī)制還不甚清楚，還有待進(jìn)一步的研究來闡明。缺氧誘導(dǎo)因子(h)，poxiainduciblefacto

2、r，HIF)在缺氧預(yù)處理中發(fā)揮著重要的作用，它是多種基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)因子，作為一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子，它參與調(diào)節(jié)細(xì)胞對(duì)各種有害刺激的適應(yīng)性反應(yīng)。HIF1是由HIF1Q和HIF1p亞單位組成的異源二聚體轉(zhuǎn)錄因子。HIF1B在細(xì)胞中組成性表達(dá)，而HIF1a是HIF1的調(diào)節(jié)及活性亞基116l。在缺氧條件下，HIF1Q得到穩(wěn)定并聚集，進(jìn)入到細(xì)胞核內(nèi)與HIF1p結(jié)合形成復(fù)合體，結(jié)合到各種基因的轉(zhuǎn)錄上游區(qū)域，調(diào)節(jié)了數(shù)十種基因的表達(dá)1171。其中包括血管再生、能

3、量代謝、細(xì)胞凋亡等多種基因118l，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子“scul盯鋤dothelialgr0、燦factor，VEGF)、紅細(xì)胞生成素(erythropoietifl，EPO)等是典型的HIF調(diào)節(jié)基因。結(jié)合NBP也具有促血管增生、改善能量代謝等多種作用，我們?cè)噲D探討HIF是否在NBP保護(hù)缺氧條件下?lián)p傷細(xì)胞中也發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，并闡述NBP調(diào)節(jié)HIF1a可能的通路。既往研究關(guān)于線粒體活性氧簇(reactiveoxygenspecie

4、s，ROS)在調(diào)節(jié)缺氧條件下HIF1a升高中所發(fā)揮的作用，觀點(diǎn)各有不同，有的認(rèn)為缺氧后線粒體內(nèi)ROS的升高是HIF1a穩(wěn)定和聚集的必要因素119’刎，有的認(rèn)為線粒體內(nèi)ROS的產(chǎn)生并不能影響HIF1Q的變化，缺氧后HIF的升高是通過其他途徑達(dá)到的12ll。ROS和一氧化氮(ni們oxide，NO)所形成的更高活性的亞硝基陰離子(peroxynitrite，ONOO)，在調(diào)節(jié)HIF中也可能發(fā)揮重要作用，它可能會(huì)升高HIF1Q的羥化，從而達(dá)到

5、減少HIF的作用122J?；谝陨咸岬降挠^點(diǎn)，我們也對(duì)NBP影響線粒體RoS和細(xì)胞內(nèi)ONOO的形成進(jìn)行了觀察，以揭示NBP可能的調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)HIF1a變化的通路。研究目的本實(shí)驗(yàn)主要觀察，NBP對(duì)缺氧條件下?lián)p傷的內(nèi)皮細(xì)胞是否發(fā)揮保護(hù)作用，及可能的保護(hù)機(jī)制。確定NBP是否通過保護(hù)缺氧條件下線粒體功能，調(diào)節(jié)線粒體內(nèi)ROS的生成和清除，達(dá)到抑制細(xì)胞內(nèi)ONOO的生成，從而間接的促進(jìn)缺氧后HIF1a的更進(jìn)一步升高，HIF通過調(diào)節(jié)下游VEGF等多種相關(guān)