缺氧誘導(dǎo)因子-1a和血管內(nèi)皮細胞生成因子在兔移植靜脈再內(nèi)皮化中的表達研究.pdf

1、缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)在血管生成表達中有重要意義，HIF-1α是缺氧狀態(tài)下血管生成的核心調(diào)控因子，通過影響其他生長因子的表達參與血管生成的全過程。VEGF是血管生成初期關(guān)鍵性的生長因子，缺氧狀態(tài)可以誘導(dǎo)VEGF大量表達。VEGF在血管生成中發(fā)揮重要作用，VEGF具有促血管內(nèi)皮細胞分裂、增殖，增加血管的通透性，誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞Bcl-2基因表達，提高內(nèi)皮細胞抗凋亡能力等作用。本實驗通過檢測缺氧誘導(dǎo)

2、因子-1α(HIF-1α)和血管內(nèi)皮細胞生成因子(VEGF)在兔頸總動脈內(nèi)膜剝脫+頸前靜脈自體靜脈移植手術(shù)前后各期的表達以及移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動脈管腔橫截面積的變化，研究HIF-1α和VEGF在兔移植靜脈再內(nèi)皮化過程中的作用。
　　 目的：
　　 探討HIF-1α和VEGF的表達對大白兔移植靜脈再內(nèi)皮化的影響。
　　 1、HIF-1α和VEGF在兔頸總動脈內(nèi)膜剝脫+頸前靜脈自體靜脈移植手術(shù)前后各期的表達關(guān)系。

3、
　　 2、移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動脈管腔橫截面積的變化
　　 方法：
　　 1、分組和制作動物模型6月齡成年雄性新西蘭大白兔46只，隨機分為兩組，第一組10只，第二組36只(其中30只為試驗必須動物，6只為備用)。均以普通飲食飼養(yǎng)一周后，采集第一組10只實驗兔的血清分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)行HIF-1α和VEGF檢測，然后取所有10只兔的左頸前靜脈行HE染色做病理學(xué)檢查，觀察動脈血管腔面積。第二組

4、36只大白兔均行左側(cè)頸總動脈內(nèi)膜剝脫+頸前靜脈自體靜脈移植術(shù)，制作再狹窄模型，術(shù)后以普通飲食飼養(yǎng)。于手術(shù)后7天、14天、30天三個時間點依次分別隨機抽取10只實驗兔采集血清用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)行HIF-1α和VEGF檢測，抽血后取該次試驗10只兔剝脫內(nèi)膜段動脈行HE染色做病理學(xué)實驗，并觀察動脈血管腔面積、內(nèi)膜增生和平滑肌數(shù)量的動態(tài)變化。
　　 2、病理學(xué)資料圖像分析采用病理學(xué)圖像分析系統(tǒng)對標(biāo)本：兔移植靜脈HE染色、M

5、ason染色片進行形態(tài)學(xué)分析。
　　 3、化學(xué)法分析分別于靜脈移植手術(shù)前和手術(shù)后7天、14天、30天采血用ELISA法測量血清中HIF-1α和VEGF的水平。
　　 結(jié)果:
　　 1、HIF-1α和VEGF各期的表達差別具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01);HIF-1α和VEGF在兔自體靜脈移植術(shù)后表達明顯增加(P＜0.01)，其中在7天時最高，之后逐漸下降，在術(shù)后30天時僅稍高于正常。
　　 2、HE染色結(jié)果

6、顯示剝脫內(nèi)膜段動脈血管腔面積(LA)總體呈先逐漸縮小，于術(shù)后14天達最低值，然后逐漸增大趨勢。
　　 結(jié)論:
　　 1、本次實驗中成功地制作了兔頸總動脈內(nèi)膜剝脫+自體靜脈移植術(shù)后再狹窄模型。
　　 2、組織器官急性缺血缺氧期HIF-1α和VEGF表達迅速增高；隨著時間延長，組織器官對缺血缺氧的適應(yīng)，兩因子濃度逐漸降低，本實驗中觀察到的HIF-1α和VEGF表達高峰出現(xiàn)在術(shù)后7天，且兩指標(biāo)在各期表達差別明顯有統(tǒng)計學(xué)

7、意義。
　　 3、移植靜脈術(shù)后血管重塑的早期HIF-1α和VEGF的高表達可促進受損血管內(nèi)皮細胞(VEC)結(jié)構(gòu)和功能的重建，維持動脈管腔面積；隨著時間推移，HIF-1α和VEGF的表達逐漸減少，移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動脈管腔逐漸縮小，于術(shù)后14天達到最小，然后逐漸增大，且動脈管腔面積在各期差別明顯有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4、HIF-1α和VEGF表達高峰和移植靜脈術(shù)后剝脫內(nèi)膜段動脈管腔最小值分別出現(xiàn)在術(shù)后7天和14天，所以