中藥合劑清火敗毒飲抑制巨噬細胞釋放TNF-α和HMGB1的研究.pdf

1、目的：中藥清火敗毒飲方(Qing Huo Bai Du Yin，QHBDY)灌喂SD-大鼠的血清干預(yù)燒傷血清刺激的RAW264.7巨噬細胞，觀察其對早期炎癥介質(zhì)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和晚期炎癥介質(zhì)高遷移率族蛋白1(high mobility group boxchromosomal protein 1，HMGB1)在RAW264.7巨噬細胞中表達的變化情況，以求了解中藥QHBDY是

2、否能夠抑制TNF-α和HMGB1的釋放。 方法：以RAW264.7巨噬細胞為研究對象，通過SD大鼠正常血清、正常血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物、正常血清+燒傷血清、燒傷血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物干預(yù)細胞，采用酶聯(lián)免疫法檢測各組上清液中TNF-α的表達量，免疫印跡技術(shù)了解細胞胞漿、胞核及細胞外HMGB1表達的變化情況。 結(jié)果：正常血清+燒傷血清干預(yù)的RAW264.7巨噬細胞上清液中TNF-α的表達量明顯升高，而

3、燒傷血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物組明顯低于燒傷組，兩者之間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，正常血清及正常血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物組上清液中TNF-α表達量極低，與前兩者之間有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。免疫印跡技術(shù)觀察發(fā)現(xiàn)：正常RAW264.7巨噬細胞胞漿、胞核中有少量HMGB1表達；正常血清及正常血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物干預(yù)后，HMGB1的表達量與正常RAW264.7巨噬細胞HMGB1表達量無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0

4、.05)；燒傷血清干預(yù)的RAW264.7巨噬細胞，其細胞漿、細胞核中的HMGB1表達量增加，而燒傷血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物干預(yù)組，HMGB1在細胞漿、細胞核的表達量增加，但較燒傷血清干預(yù)組低，兩組有統(tǒng)計學(xué)意義.在正常血清、正常血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物及正常培養(yǎng)基培養(yǎng)的RAW264.7胞外未檢測出HMGB1，在正常血清+燒傷血清組和燒傷血清+中藥灌喂SD-大鼠血清混合物組的培養(yǎng)基中18小時檢測到HMGB1，燒傷組明顯高