載蛋白三甲基殼聚糖納米?？诜o藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、三甲基殼聚糖(TMC)是殼聚糖的季銨鹽衍生物，與殼聚糖僅在酸性pH條件下具有水溶性相比，TMC在更廣的pH值范圍內(nèi)都具有良好的水溶性。同時，由于殼聚糖在腸道堿性pH值條件下失去電荷，降低了其促吸收作用，而TMC在堿性條件下仍然帶有高密度的正電荷，因此具有更好的促吸收作用。 可生物降解納米粒具有在胃腸道內(nèi)保護藥物不被降解、提高藥物的跨膜轉(zhuǎn)運及M細胞的胞吞作用、緩釋或控釋藥物等優(yōu)點，這些優(yōu)點使其成為蛋白質(zhì)口服給藥系統(tǒng)的優(yōu)良載體。同時

2、，三甲基殼聚糖納米?？梢酝ㄟ^離子交聯(lián)法制備，此法制備條件溫和，無需使用有機溶劑，因此可以在制備過程中最大程度的保持蛋白質(zhì)和疫苗的活性。 本課題以三甲基殼聚糖為載體材料，選取兩種模型蛋白及一種疫苗藥物，制備了載蛋白三甲基殼聚糖納米粒，并考察其作為口服蛋白給藥系統(tǒng)的可行性。以兩種具有相似分子量、但不同等電點的模型蛋白-牛血清白蛋白(BSA)及牛血紅蛋白(BHb)，考察了TMC納米粒對具有不同等電點的蛋白質(zhì)的載藥能力和藥物釋放規(guī)律，以

3、及TMC季銨化度對其載藥和釋放規(guī)律的影響。并且利用Caco-2細胞模型對其促進藥物透過和吸收的能力進行研究。同時，以一種治療幽門螺桿菌感染的疫苗藥物-尿素酶為模型藥物，考察了TMC納米粒作為口服疫苗載體的免疫加強作用。首先，以殼聚糖為原料，通過一步和二步合成的方法制備TMC。改變合成反應的步驟和反應時間，制備了不同季銨化度的TMC。研究發(fā)現(xiàn)，制得的TMC在酸性和堿性條件下均具有良好的水溶性。通過離子交聯(lián)法制備了TMC納米粒(TMCNP)

4、，結(jié)果顯示，交聯(lián)劑三聚磷酸鈉(TPP)的濃度過高或過低均無法制得納米粒膠體溶液。TMCNP溶液的pH值和TMC成球率均隨TPP濃度的增加而升高。同時，TMC的季銨化度對TMCNP的性質(zhì)也有影響。當TPP濃度保持同一水平時，TMCNP溶液的pH值隨TMC季銨化度的升高而降低，TMC成球率的成球率則呈下降趨勢。 以兩種具有不同等電點的蛋白質(zhì)藥物一牛血清白蛋白(BSA)及牛血紅蛋白(BHb)為模型藥物，考察了TMCNP對不同蛋白質(zhì)的載

5、藥能力，及體外釋放性質(zhì)。結(jié)果表明，以方法A制備的TMCNP對BSA的包封率較高(95％)，而對BHb的包封率則較低(30％)。TMCNP的粒徑和zeta電位受BSA濃度的影響較大，但幾乎不受BHb濃度的影響。使用季銨化度較低的TMC制備的納米粒粒徑較大，zeta電位較低，且藥物的釋放也較慢。以方法B制備的BSA-TMCNP經(jīng)海藻酸鈉(SL)修飾，所得納米粒的粒徑減小、zeta電位降低，且BSA的突釋明顯降低。使用方法C，即將BHb先溶于

6、TPP溶液以獲取負電荷后再制備TMCNP，可顯著增加包封率，且對藥物的體外釋放規(guī)律無影響。 利用Caco-2細胞模型研究了TMCNP的促吸收作用。結(jié)果顯示，不論是未修飾的TMCNP還是SL修飾的TMCNP都能夠提高藥物的跨膜吸收，打開細胞間緊密連接，促進藥物的細胞旁路轉(zhuǎn)運。海藻酸鈉修飾的TMCNP比未修飾的TMCNP具有更高的透過效率。但海藻酸鈉對TMCNP降低TEER及促進藥物細胞旁路轉(zhuǎn)運的作用幾乎沒有影響。 最后，還