“加味當(dāng)歸芍藥散方”對(duì)糖尿病早期腎損害大鼠TGF-β1及NO表達(dá)的影響.pdf

1、目的：采用鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)尾靜脈注射所致糖尿病大鼠為動(dòng)物模型，以卡托普利作為陽(yáng)性對(duì)照藥物，觀察“加味當(dāng)歸芍藥散方”對(duì)實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠早期腎損害的一般療效，探討“加味當(dāng)歸芍藥散方”對(duì)糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用并探討其作用機(jī)制，深化對(duì)糖尿病腎病的中醫(yī)病機(jī)認(rèn)識(shí)，為臨床防治糖尿病腎病提供科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)及臨床新藥開發(fā)作一些前導(dǎo)性的基礎(chǔ)工作。 方法：實(shí)驗(yàn)選取雄性Wistar大鼠58只，隨機(jī)抽取12只大鼠列為正

2、常對(duì)照組(CON組)。余46只造模，大鼠空腹?fàn)顟B(tài)按照60mg/kg劑量一次性進(jìn)行尾靜脈注射配制好的STZ溶液。7天后尾部取血測(cè)空腹血糖值，選取血糖值>11.1mmol/L大鼠為DM大鼠，納入實(shí)驗(yàn)；將成模大鼠隨機(jī)分為模型組(DM組)、中藥組(CPA組)、西藥組(ACEI組)。中藥組使用“加味當(dāng)歸芍藥散方”煎劑灌胃(劑量為13.2g/kg/d)；西藥組使用卡托普利水溶液(劑量為7.13mg/kg/d)灌胃。正常組和模型組使用同體積生理鹽水灌

3、胃。4周后，測(cè)定每只大鼠體重，留取24小時(shí)尿液，非麻醉處死大鼠，測(cè)定血糖(FBG)、腎重指數(shù)、內(nèi)生肌酐清除率(Ccr)、24小時(shí)尿微量白蛋白(UALB)、β2→微球蛋白(U β 2-MG)、膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及腎組織中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)和一氧化氮(NO)的表達(dá)。留取腎皮質(zhì)標(biāo)本進(jìn)行光鏡拍照、觀察，利用病理圖像分析系統(tǒng)測(cè)定TGF-β1和NO在腎小球的平均光密度值。 結(jié)果：

4、1 早期腎損傷各實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)：正常組大鼠尿微量白蛋白、β2微球蛋白、內(nèi)生肌酐清除率與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。與模型組比，中藥組尿微量白蛋白、β2-微球蛋白可顯著降低(P<0.01)，內(nèi)生肌酐清除率明顯降低(P<0.05)；西藥組尿微量白蛋白、β2-微球蛋白顯著減低(P<0.01)，對(duì)Ccr無(wú)明顯影響(P>0.05)。 2 腎重指數(shù)：與正常組比較，各組糖尿病大鼠腎重指數(shù)顯著上升，尤其是模型組大鼠腎重指數(shù)顯著升高，差異

5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型組比，中藥組和西藥組腎重指數(shù)均能明顯降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 3 血脂：與正常組比較，糖尿病模型組和西藥組膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白顯著升高(P<0.01)。中藥組膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平顯著降低，與正常組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。與模型組比較，中藥組各指標(biāo)顯著降低(P<0.01)。西藥組各血脂指標(biāo)與模型組相比無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 4 對(duì)T

6、GF-β1表達(dá)的影響：與正常組比，模型組表達(dá)顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，中藥組陽(yáng)性區(qū)百分比、平均積分光密度、陽(yáng)性區(qū)平均積分光密度顯著降低(P<0.01)，卡托普利組陽(yáng)性區(qū)百分比、平均積分光密度顯著降低(P<0.01)，陽(yáng)性區(qū)平均積分光密度明顯降低(P<0.05)。 5 對(duì)NO表達(dá)的影響：與正常組比，模型組表達(dá)顯著升高(P<0.01)。與模型組比較，中藥組陽(yáng)性區(qū)百分比、陽(yáng)性區(qū)平均積分光密度顯著降低(P<0.01)，平均積分光密

7、度明顯降低(P<0.05)：卡托普利組平均積分光密度、陽(yáng)性區(qū)平均積分光密度顯著降低(P<0.01)，陽(yáng)性區(qū)百分比明顯降低(P<0.05)。 6 血糖：與正常組比，模型組、中藥組、西藥組開始血糖水平顯著高于正常組(P<0.0.01)，提示：鏈脲佐菌素造糖尿病模型成功，且高血糖無(wú)自然緩解趨勢(shì)。與模型組比，中藥組給藥后第四周血糖值輕度降低(P<0.05)，對(duì)第二周血糖無(wú)明顯影響(P<0.05)。 7 病理：腎小球毛細(xì)血管基底膜

8、厚度：所有糖尿病組均大于正常組，藥物治療組顯著低于DM組。 結(jié)論： 1 注射STZ后，三組糖尿病大鼠都出現(xiàn)了糖尿病癥狀及腎臟早期的損傷，表現(xiàn)出腎臟肥大和腎小球基底膜增厚。 2“加味當(dāng)歸芍藥散方”對(duì)DM大鼠有輕度降糖作用，可以改善DM大鼠一般狀態(tài)，降低腎重指數(shù)，降低尿肌酐、血肌酐，提高內(nèi)生肌酐清除率，改善脂質(zhì)代謝紊亂，降低尿微量白蛋白和β2-微球蛋白的排泄，同時(shí)能改善腎臟的病理形態(tài)損傷。 3“加味當(dāng)歸芍藥散