來氟米特對糖尿病大鼠腎組織MCP-1、TGF-β的影響.pdf

1、目的：研究表明炎癥因子在糖尿病腎病的發(fā)病機制中起了重要的作用。本研究通過建立糖尿病大鼠動物模型，給予來氟米特干預，觀察各組腎組織病理變化，應用免疫組化以及半定量RT-PCR方法檢測各組MCP-1、TGF-β1表達情況，探討來氟米特對糖尿病大鼠腎組織中MCP-1、TGF-β1表達的影響，進一步闡述來氟米特對早期糖尿病腎病的作用。
　　方法：SD雄性大鼠54只，隨機分為三組，即正常對照組（NC組），糖尿病組（DM組），來氟米特干預組（

2、LEF組），每組18只。DM組、LEF組給予一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)50mg/kg,NC組給予等量緩沖液。成模后LEF組給予來氟米特懸浮液5mg/kg.d灌胃。于第4、6、8周末處死大鼠，處死前留取24h尿量檢測24h尿蛋白定量，內眥靜脈采血檢測血糖、肌酐、尿素氮，留取兩側腎臟，HE染色及PAS染色觀察腎組織病理改變，免疫組織化學方法檢測腎組織MCP-1、TGF-β1蛋白表達，半定量RT-PCR法

3、檢測腎組織MCP-1、TGF-β1mRNA表達。
　　結果：（1）成模后糖尿病大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿、消瘦等糖尿病典型癥狀表現(xiàn)；（2）第4周糖尿病大鼠出現(xiàn)蛋白尿，DM組、LEF組24h尿蛋白定量均明顯高于同時期NC組（P＜0.01）；LEF組24h尿蛋白定量均明顯低于同時期DM組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；（3）第4、6、8周，DM組、LEF組尿素氮、肌酐水平均高于NC組（P＜0.05）；LEF組肌酐水平較同時期DM組

4、比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；第4周，LEF組尿素氮水平較DM組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），第6、8周，LEF組尿素氮水平低于DM組（P＜0.05）；（4）腎組織病理結果顯示：DM組大鼠腎小球系膜細胞明顯增生，腎小球體積增大，腎小管變性擴張萎縮明顯，間質大量炎細胞浸潤，并隨著時間的延長，病理改變加重，第8周病理損害積分（8.58±0.61）；LEF組腎小球系膜細胞輕度增生，腎小管變性擴張較輕，間質局灶性炎細胞浸潤，第8

5、周病理損害積分（5.33±1.21），病理改變均較同時期DM組明顯減輕（P＜0.01）。（5）免疫組化結果：MCP-1、TGF-β1蛋白表達主要在腎小管上皮細胞表達，腎小球系膜細胞表達較少。第4、6、8周，DM組、LEF組MCP-1、TGF-β1蛋白表達均明顯高于NC組（P＜0.01）；第4周，LEF組MCP-1、TGF-β1蛋白表達與DM組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），第6、8周，LEF組MCP-1、TGF-β1蛋白表達低于

6、DM組（P＜0.05）。（6）半定量RT-PCR結果顯示：第4、6、8周，DM組、LEF組腎組織MCP-1、TGF-β1mRNA表達均顯著高于NC組（P＜0.01）；LEF組腎組織MCP-1、TGF-β1mRNA表達均顯著低于DM組（P＜0.01）。（7）相關性結果顯示：MCP-1、TGF-β1蛋白表達與24h尿蛋白定量、腎組織病理損害之間均呈正相關，并且MCP-1、TGF-β1蛋白表達之間亦呈顯著正相關。
　　結論：來氟米特可能