一、兔外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞的分離培養(yǎng)、鑒定和體外標(biāo)記;二、G-CSF對(duì)頸動(dòng)脈狹窄模型兔內(nèi)皮祖細(xì)胞的動(dòng)員作用.pdf

1、目的：研究新西蘭大白兔外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial progenitor cells，EPCs)的分離、培養(yǎng)方法，對(duì)其進(jìn)行功能鑒定，同時(shí)用增強(qiáng)型綠色熒光蛋白(Enhanced green fluorescent protein EGFP)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記示蹤，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究做好準(zhǔn)備。 方法：①健康雄性新西蘭大白兔為研究對(duì)象，密度梯度法分離兔外周血單個(gè)核細(xì)胞(MNCs)，采用專(zhuān)用的EGM-2-MV完全培養(yǎng)基對(duì)單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)

2、行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，將其接種在人纖維連接蛋白包被培養(yǎng)板，動(dòng)態(tài)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程。②通過(guò)DiL標(biāo)記的乙?；兔芏戎鞍缀虵ITC標(biāo)記的凝集素UEA-1雙染法鑒定血管內(nèi)皮祖細(xì)胞，顯示紅色熒光的為吞噬了乙?；兔芏戎鞍椎募?xì)胞，綠色熒光為結(jié)合UEA-1的細(xì)胞，雙染色為橙色熒光。③用攜帶綠色熒光蛋白基因的腺病毒液對(duì)培養(yǎng)7天細(xì)胞進(jìn)行感染，用熒光顯微鏡觀察細(xì)胞綠色熒光蛋白表達(dá)情況。 結(jié)論：①?gòu)耐猛庵苎心艹晒Φ胤蛛x培養(yǎng)出具有血管內(nèi)皮祖細(xì)胞特征的細(xì)