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文檔簡介
1、目的:觀察血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)移植治療慢性深靜脈血栓的療效。
方法:1、結扎家兔(2.5kg左右)腎下段后腔靜脈建立慢性深靜脈血栓模型,隨機分成三組,即:A組、B組和 C組,每組20只動物。2、人胚腎細胞293A(HEK293A)擴增腺病毒至適當?shù)牡味取?、打開腹腔在血栓段遠端注射,行移植實驗:A組:注射10μL攜帶有VEGF165基因的免疫缺陷型
2、腺病毒(Ad-GFP-VEGF165),病毒基因組滴度109PFU/ml;B組:注射10μL空白質粒載體(Adv-GFP);C組:注射10μl生理鹽水。4、不同時間段取出血栓段下腔靜脈及血栓,應用HE染色及vWF免疫組化染色觀察血栓機化、血管再通情況,高倍顯微鏡下計數(shù)血栓中再通毛細血管數(shù)量。
結果:1、經(jīng)HEK293A細胞擴增可獲得高滴度的腺病毒。2、構建兔下腔靜脈慢性血栓模型方法簡單、快速、血栓形成確切;3、VEGF165基
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