CO-,2-氣腹下子宮惡性腫瘤腹腔鏡手術(shù)影響腫瘤細胞種植和轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、第一章腹腔鏡手術(shù)治療子宮惡性腫瘤的安全性問題 目的：穿刺部位轉(zhuǎn)移(PSM)的出現(xiàn)是惡性腫瘤的微創(chuàng)手術(shù)中最嚴重的并發(fā)癥，是可能限制腹腔鏡手術(shù)在惡性腫瘤治療中應用的焦點問題。 方法：利用國內(nèi)外文獻庫，搜索子宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌腹腔鏡術(shù)后報道的PSM現(xiàn)象和相關(guān)機制；搜索有關(guān)子宮頸癌和子宮內(nèi)膜癌腹腔鏡手術(shù)并發(fā)癥和預后的臨床研究。 結(jié)果：共報道了15例宮頸癌和7例子宮內(nèi)膜癌的PSM現(xiàn)象。PSM發(fā)生的主要病因?qū)W有：①腫瘤細胞直

2、接污染手術(shù)中穿刺套管部位；②煙霧化作用和煙囪效應；③免疫反應：④手術(shù)技巧；⑤CO<,2>氣腹。其中CO<,2>氣腹的作用最引人注目，CO<,2>氣腹主要作用機理有：①CO<,2>氣腹對腹膜造成的局部組織創(chuàng)傷；②CO<,2>氣腹形成的腹腔酸性環(huán)境影響惡性腫瘤細胞生物學行為；③CO<,2>氣腹對宿主局部免疫能力的抑制；@C02氣腹對轉(zhuǎn)移相關(guān)粘附分子的影響：⑤CO<,2>氣腹對腫瘤細胞生長的作用等等。 結(jié)論：PSM在子宮惡性腫瘤的腹腔

3、鏡手術(shù)中發(fā)生率低。大量資料顯示己完成的腹腔鏡手術(shù)的并發(fā)癥發(fā)生率和術(shù)后腫瘤復發(fā)率與傳統(tǒng)開腹手術(shù)相比無區(qū)別。但子宮惡性腫瘤的腹腔鏡手術(shù)的安全性問題要經(jīng)循證醫(yī)學論證，將需要大樣本的前瞻性隨機臨床研究的證據(jù)。 第二章CO<,2>氣腹下宮頸癌腹腔鏡手術(shù)對癌細胞種植和轉(zhuǎn)移能力的影響 目的：通過觀察CO<,2>氣腹下宮頸癌的腹腔鏡手術(shù)是否對反映癌組織種植和轉(zhuǎn)移能力的指標E一鈣粘素(E-cadherin)、β-連環(huán)素(β-catenin

4、)、P-選擇素(P-selectin)、基質(zhì)金屬蛋白酶一2(MMP．2)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血管內(nèi)皮生長因子-C(VEGFF-C)的表達有影響，來尋找宮頸癌腹腔鏡手術(shù)可能影響腫瘤種植和轉(zhuǎn)移的臨床基礎依據(jù)。 方法：選擇2005年9月～2006年9月在佛山市第一人民醫(yī)院婦科，F(xiàn)IGO臨床分期Ⅰ a-Ⅱa，行腹腔鏡手術(shù)的宮頸癌病例20例和同期行開腹手術(shù)的病例10例。 腹腔鏡手術(shù)采用15-1711全自動氣腹機(德國

5、Ackerman Instrumente)形成C02氣腹，每充氣流量設定4至6L/min，腹腔內(nèi)CO<,2>氣腹壓力均維持在13mmHg。 收集20例腹腔鏡手術(shù)剛開始和結(jié)束前的腹腔沖洗液、手術(shù)過程中CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液行腫瘤細胞學檢查。DAKO Envision二步法檢測患者手術(shù)開始時和手術(shù)結(jié)束前的宮頸癌組織的E-cadherin、β-catenin、P-selectin、MMP-2、VEGF蛋白表達；熒光定量RT

6、-PCR方法檢測宮頸癌組織的E-cadherin、MMP-2和VEGFF-CmRNA表達。 結(jié)果：腹腔鏡組手術(shù)中消耗的CO<,2>氣體平均總量(546．00±197．0)L。20例宮頸癌患者腹腔鏡手術(shù)開始時和結(jié)束前的腹腔沖洗液、CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液的腫瘤細胞學檢查均未找到癌細胞。 腹腔鏡組宮頸癌組織的E-cadherin、β-catenin蛋白的異常表達在手術(shù)后有輕微提高，但腹腔鏡組和開腹組的手術(shù)前后癌組織

7、這兩種蛋白的異常表達無差異(P>0．05)；在腹腔鏡組和開腹組之間比較手術(shù)前后E-cadherin、β-catenin蛋白的異常表達變化情況無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 分別比較腹腔鏡組手術(shù)前后和開腹手術(shù)前后宮頸癌組織中MMP-2、P-selectin和VEGF這三種蛋白的陽性表達和強陽性表達均無顯著性差異(P>0．05)。MMP-2、P-selectin蛋白在腹腔鏡組術(shù)后的增加趨勢似較開腹手術(shù)稍明顯；但在腹腔鏡組和開腹組兩種

8、不同手術(shù)方式之間，比較手術(shù)前后MMP-2、P-selectin的陽性表達和表達強度的差別無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 腹腔鏡組和開腹組手術(shù)后E-cadherin mRNA表達均有降低趨勢，MMP-2和vEGF-C mRNA表達有增加趨勢；但腹腔鏡組和開腹組手術(shù)前后E-cadherin、MMP-2和VEGP-C mRNA表達無明顯差異(P>0．05)。在腹腔鏡組和開腹組之間比較手術(shù)前后E-cadherin、MMP-2和VEGF-

9、C的mRNA含量的變化情況均無統(tǒng)計學差異(P>0．05)。 結(jié)論：20例CO<,2>氣腹下的宮頸癌腹腔鏡手術(shù)沒有促進在宮頸癌種植和轉(zhuǎn)移過程中起重要作用的一些因子表達。在本項研究范圍內(nèi)沒有找到CO<,2>氣腹下宮頸癌腹腔鏡手術(shù)促進早期宮頸癌轉(zhuǎn)移的依據(jù)。 第三章CO<,2>氣腹下子宮內(nèi)膜癌腹腔鏡手術(shù)對癌細胞種植和轉(zhuǎn)移能力的影響.目的：擬結(jié)合臨床病例特點，觀察CO<,2>氣腹腹腔鏡手術(shù)前后與內(nèi)膜癌坌山胞侵潤和轉(zhuǎn)移潛能緊密相關(guān)的

10、指標E-cadherin、β-catenin、P-selectin、MMP-2、VEGF和VEGF-C的變化情況，研究C02氣腹下子宮內(nèi)膜癌腹腔鏡手術(shù)是否對癌細胞種植和轉(zhuǎn)移能力有影響，為腹腔鏡手術(shù)在子宮內(nèi)膜癌的應用尋找臨床基礎理論依據(jù)。 方法：選擇2005年9月～2006年9月在佛山市第一人民醫(yī)院婦科，術(shù)前臨床分期Ⅰ期，行腹腔鏡下手術(shù)的子宮內(nèi)膜癌病例20例和同期行開腹手術(shù)的病例10例。 腹腔鏡手術(shù)采用15-1711全自動

11、氣腹機(德國 Ackerman Instrumente)形成C02氣腹，每充氣流量設定4至6L/min，腹腔內(nèi)CO<,2>氣腹壓力均維持在13minHg。 收集20例腹腔鏡手術(shù)剛開始和結(jié)束前的腹腔沖洗液、手術(shù)過程中CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液行腫瘤細胞學檢查。DAKO Envision二步法檢測患者手術(shù)開始時和手術(shù)結(jié)束前內(nèi)膜癌組織的E-cadherin、β-catenin、P-selectin、MMP-2、VEGF蛋白的表

12、達。熒光定量RT-PCR方法檢測內(nèi)膜癌組織的E.cadherin、MMP.2和VEGF-CmRNA表達。 結(jié)果：腹腔鏡組包括18例FIGO手術(shù)病理分期Ⅰ期和2例Ⅲc期，手術(shù)中消耗的C02氣體平均總量(291.22+162.17)L；手術(shù)剛開始和結(jié)束前的腹腔沖洗液、CO<,2>氣體濾過液和器械沖洗液的腫瘤細胞學檢查均未找到癌細胞，其中包括15例(75％)術(shù)前經(jīng)宮腔鏡診刮確診。 E-cadherin、β-catenin蛋白在

13、內(nèi)膜癌中表達呈明顯異常，腹腔鏡組手術(shù)前后E.cadherin和fj.catenin異常表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，在腹腔鏡組和開腹組之間分別比較手術(shù)前后E-cadherin和β-catenin的異常表達變化情況無顯著性差異(P>0.05)。 腹腔鏡手術(shù)前后和開腹手術(shù)前后，P-selectin、MMP-2和VEGF蛋白的表達情況均無明顯差異(P>0.05)，且在兩種手術(shù)方式中比較手術(shù)前后蛋白表達的變化情況無統(tǒng)計學差異(P>0

14、.05)。 E-cadherin、MMP-2和VEGF-C的mRNA表達量在腹腔鏡手術(shù)和開腹手術(shù)前后比較無明顯差異，且在兩種手術(shù)方式中比較手術(shù)前后這三種mRNA表達量的變化情況無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 結(jié)論：本研究證實早期子宮內(nèi)膜癌的腹腔鏡手術(shù)中發(fā)生直接種植轉(zhuǎn)移的可能性較小，腹腔鏡手術(shù)沒有促進與子宮內(nèi)膜癌侵潤和轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)因子的表達。通過本研究沒有找到CO<,2>氣腹下子宮內(nèi)膜癌腹腔鏡手術(shù)促進癌細胞種植和轉(zhuǎn)移的

15、依據(jù)。 第四章CO<,2>氣腹下子宮惡性腫瘤腹腔鏡手術(shù)中腹膜微環(huán)境的改變和意義. 目的：腹膜微環(huán)境改變是腹腔鏡手術(shù)中最有特征性改變之一。研究子宮惡性腫瘤腹腔鏡于術(shù)中腹膜間皮細胞生物學行為的改變，了解腹膜微環(huán)境變化對腫瘤細胞種植和轉(zhuǎn)移的可能影響。 方法：選擇2005年9月至2006年9月行腹腔鏡手術(shù)的宮頸癌和內(nèi)膜癌各20例，與同期行開腹手術(shù)的宮頸癌和內(nèi)膜癌各10例進行對比。 DAKO Envision二步法

16、檢測患者手術(shù)開始時和手術(shù)結(jié)束前腹膜間皮細胞的細胞問粘附分子-1(ICAM-1)和整合素β1(β1-integrin)蛋白的表達。 放免法測定不同手術(shù)時間的腹膜(開始時，手術(shù)1h、2h、3h和結(jié)束前)透明質(zhì)酸濃度和術(shù)后不同時間的血透明質(zhì)酸濃度(術(shù)后第1天、第3天和第5天)。 DAKO Envision二步法和熒光定量RT-PCR方法分別測定手術(shù)前后腫瘤組織的CD44v6蛋白表達和mRNA含量。 結(jié)果：隨腹腔鏡和開腹