人臍血單個(gè)核細(xì)胞誘導(dǎo)肝樣細(xì)胞的研究.pdf

1、目的：分別在體外采用有細(xì)胞因子的培養(yǎng)體系和無細(xì)胞因子的培養(yǎng)體系誘導(dǎo)培養(yǎng)臍血單個(gè)核細(xì)胞，觀察肝細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)，探討體外采用細(xì)胞因子誘導(dǎo)臍血單個(gè)核細(xì)胞(MNC)定向分化為肝細(xì)胞的可能性。 方法：采集正常產(chǎn)婦臍帶血，密度梯度離心法分離、純化臍血單個(gè)核細(xì)胞(MNC)。分別用肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、HGF+FGF、無生長(zhǎng)因子4種處理因素進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，采用PT-PCR和免疫組化鑒定肝細(xì)胞標(biāo)志物的表達(dá)情況。統(tǒng)

2、計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，用單因素方差分析和t檢驗(yàn)對(duì)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果：1．密度梯度離心法分離的臍帶血單個(gè)核細(xì)胞，活力及純度>95％。CD34<'+>細(xì)胞平均為0.96±0.12％。2．有細(xì)胞因子培養(yǎng)組誘導(dǎo)后第7和21天分別檢測(cè)出肝細(xì)胞標(biāo)志物AFP和白蛋白mRNA的表達(dá)，第28天檢測(cè)出CK-18、抗肝細(xì)胞抗體的表達(dá)。第21天和28天均可檢測(cè)到糖原染色陽性細(xì)胞。無細(xì)胞因子培養(yǎng)組始