深低溫凍存對(duì)臍血單個(gè)核細(xì)胞免疫特性影響的研究.pdf

1、本文研究了凍存過程對(duì)臍血造血細(xì)胞免疫表型和細(xì)胞因子分泌量的影響，為臍血的臨床移植提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：18例臍血標(biāo)本經(jīng)比重為1.077的Ficoll-Hypaque分離液分出單個(gè)核細(xì)胞(MNC)后，分成三組，即新鮮標(biāo)本對(duì)照組、DMSO對(duì)照組及低溫凍存組。低溫凍存組加二甲亞砜(終濃度為10％)，經(jīng)程控降溫后放-196℃液氮保存，凍存30天后在40℃的水浴中快速?gòu)?fù)蘇。復(fù)蘇后其它兩組一樣進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、臺(tái)盼藍(lán)拒染率檢測(cè)；通過流式細(xì)胞儀用

2、單克隆抗體檢測(cè)單個(gè)核細(xì)胞中CD4+、CD8+細(xì)胞亞群的比例；并經(jīng)PHA刺激，培養(yǎng)72小時(shí)，用ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清液中白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、γ-干擾素(IFN-γ)及粒-巨細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)的含量。 結(jié)果：臺(tái)盼藍(lán)拒染率比新鮮標(biāo)本對(duì)照組有所下降(t=7.55,P＜0.01)。細(xì)胞亞群CD4+細(xì)胞比例明顯升高(t=-2.83～-2.73，P＜0.05)。IL-2、IL-6及IFN-γ

3、三種細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果，除IL-6與新鮮標(biāo)本對(duì)照組比較差別不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其它均有所上升(t=-7.91～-2.60，P＜0.01或P＜0.05)。GM-CSF與DMSO對(duì)照組無差別，而與新鮮標(biāo)本對(duì)照組比較檢測(cè)結(jié)果有下降現(xiàn)象(t=7.74，P＜0.01)。 結(jié)論：凍存造成了淋巴細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子分泌量的變化，這一現(xiàn)象表明，凍存提高了臍血造血細(xì)胞的免疫功能。在臍血移植后，這可能有利于機(jī)體早期免疫機(jī)能的重建，提高抗感染、抗腫瘤的能力