深低溫凍存對大月齡胎兒帶瓣血管材料免疫原性的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 目的：通過研究深低溫保存前后大月齡胎兒主、肺動脈帶瓣血管組織相容性白細胞抗原(HLA)的表達情況，了解HLA抗原的表達位置以及深低溫保存過程對HLA抗原表達的影響。 方法：取腦死亡胎兒(胎齡28周以上)主、肺動脈帶瓣血管10例，熱缺血時間要求在12小時之內(nèi)。每例標本分成兩部分，一部分新鮮者作為對照組；另一部分為實驗組經(jīng)M199原液與二甲基亞砜(DMSO)處理后浸入液氮中深低溫凍存。所有標本用冰凍切片包埋劑(ZLI-930

2、2)放在不銹鋼包埋模具上快速冷凍。它們被儲存在-20℃冰箱，然后用恒冷箱切片機(Leica CM 1900)切片。所有切片包在銀箔中儲存在-20℃冰箱中直到被染色，用免疫組化的方法利用鼠抗人單克隆抗體：HLA-ABC(0736)、HLA-DR(ZM-0136)，CD45RO(ZM-0055)，CD34(ZM-0046)，檢測冷凍前后人組織相容性白細胞抗原Ⅰ類(HLAABC)、Ⅱ類(HLADR，DP，DQ)和內(nèi)皮細胞的變化情況，并將檢測結(jié)

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