陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥患者CD34+CD59+細胞體外擴增及裸鼠移植的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)是一種后天獲得性慢性溶血性疾病,以反復的血管內溶血、慢性貧血及血栓形成為主要臨床特征.PNH的一個顯著特點是患者體內異常克隆與正常造血細胞長期共存,但機制并不十分清楚.另外,PNH目前仍無有效的根治方法.PNH正??寺∈欠裾嬲?能否在自體干細胞移植時重建造血?本文針對這些問題進行了研究,其結果將為開展新的治療(自體干細胞移植)提供實驗依據(jù).本文首先研究了利用細胞因子組合進行正常人骨髓造血干/祖細胞擴

2、增,將擴增后的細胞移植給接受亞致死劑量照射的裸鼠,觀察移植后裸鼠體內人造血干細胞的表達以及多向分化的情況,建立可靠的移植模型.在此基礎上,我們將PNH患者體內正常造血干/祖細胞(CD34+CD59+)分離出來,進行體外擴增后輸注給接受亞致死劑量照射的BALB/c裸鼠來研究其增殖能力以及重建造血的情況,并且將PNH患者CD34+CD59+細胞與正常人CD34+細胞在裸鼠體內表達情況進行比較研究,以期為臨床應用提供實驗依據(jù).本研究首先利用免

3、疫磁珠方法分選出正常人CD34+細胞,并在細胞因子組合SCF+IL-3+IL-6+TPO+EPO+FLT-3作用下進行體外擴增,最適宜擴增時間為第7天,在此條件下擴增倍數(shù)為57.38±2.50倍.進一步利用免疫磁珠雙陽性分選法分選出PNH患者CD34+CD59+細胞,將其與正常人CD34+細胞的擴增過程以及擴增后的干/祖細胞在裸鼠體內的表達情況進行比較,結果顯示:(1)PNH患者的CD34+CD59+細胞可以在裸鼠體內成功存活.(2)接

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