5-ALA-PDT對婦科惡性腫瘤細胞的殺傷作用及對SKOV3細胞HSP70、HO-1和HIF-1α表達的影響.pdf

1、婦科腫瘤的傳統(tǒng)治療方法是手術(shù)、放療和化療，這些方法在殺傷腫瘤細胞的同時，會對正常細胞產(chǎn)生不可避免的損傷，從而帶來一些嚴重的并發(fā)癥，有時不得不終止治療。對于不能耐受手術(shù)、放化療的患者，拒絕手術(shù)治療的患者以及對化療產(chǎn)生耐藥的患者，迫切需要一種溫和有效的治療方法。光動力療法(photodynamic therapy，PDT)治療婦科腫瘤由此應(yīng)運而生。不同腫瘤對PDT的敏感性不同。PDT致腫瘤細胞的凋亡率未達到100％，提示細胞中可能存在某些抵

2、抗PDT的保護因素。研究表明，腫瘤細胞中的熱休克蛋白70(heat shock protein70，HSP70)、血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)及缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)可在氧化應(yīng)激狀態(tài)及某些藥物作用下被激活，抑制細胞凋亡，從而起到保護腫瘤細胞的作用。本研究旨在體外細胞實驗研究5-氨基酮戊酸（5-aminolevulinic acid，5-

3、ALA）介導(dǎo)的光動力療法(5-ALA-PDT)對人類卵巢癌SKOV3細胞系、富頸癌Hela細胞系和子宮內(nèi)膜癌KLE細胞系的殺傷作用，觀察5-ALA-PDT對卵巢癌SKOV3細胞系HSP70、HO-1及HIF-1α表達的影響。
　　 目的：探討5-ALA-PDT對體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV3細胞、宮頸癌Hela細胞和子宮內(nèi)膜癌KLE細胞的殺傷作用。
　　 方法：選擇人卵巢癌SKOV3細胞系、宮頸癌Hela細胞系和子宮內(nèi)膜癌

4、KLE細胞系，分為僅加光敏劑而不照光的單純光敏劑組（5-ALA組）、僅照光而不加光敏劑的單純照光組（PDT組）、既加光敏劑又照光的5-ALA-PDT組和既不加光敏劑也不照光的正常對照組。在培養(yǎng)過程中對不同組別的3種細胞進行干預(yù)。采用CCK-8法檢測5-ALA-PDT對3種細胞增殖的抑制作用。
　　 結(jié)果：5-ALA組細胞在0.1～1mM濃度時幾乎無死亡，＞2.0mM時細胞抑制率升高(SKOV3:2.0mM,2.83％;4.0Mm

5、,6.30％。Hela:2.0mM,4.79％;4.0Mm,7.78％。KLE:2.0mM，8.90％:4.0Mm，10.58％。)，分別與正常對照組相比較，均有顯著性差異(P＜0.05)。PDT組細胞與正常對照組相比，生長基本不受影響(P＞0.05)。5-ALA-PDT組SKOV3、Hela和KLE細胞的抑制率均表現(xiàn)為隨著5-ALA濃度及激光能量密度的升高而升高(P＜0.05)；當光敏劑濃度達到2.0mM，激光能量密度達到5.0J/c

6、m2時，細胞生長抑制率上升不明顯(P＞0.05)，進入平臺期。5-ALA-PDT后細胞抑制率隨時間變化，24h達到高峰，以后逐漸下降。SKOV3的IC50值最高(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：5-ALA-PDT對SKOV3、Hela和KLE細胞有殺傷作用，該作用存在濃度飽和及光能量飽和現(xiàn)象；5-ALA-PDT后細胞抑制率具有時效性；3種細胞對5-ALA-PDT的敏感性不同，其中SKOV3最不敏感。
　　 目的：探討5-A

7、LA-PDT對人卵巢癌SKOV3細胞系HSP70、HO-1及HIF-1α表達的影響。
　　 方法：選擇人卵巢癌SKOV3細胞系，分為既加光敏劑又照光的5-ALA-PDT組和既不加光敏劑又不照光的正常對照組。熒光Real-timePCR相對定量法檢測卵巢癌細胞系SKOV3細胞正常對照組及5-ALA-PDT組干預(yù)后3h、12h、24h、48h、72h后HSP70、HO-1及HIF-1α的表達情況。
　　 結(jié)果：5-ALA-P

8、DT組的3種細胞干預(yù)后，隨著時間的推移(3h，12h，24h，48h，72h)，HSP70的表達呈上升趨勢，12h組與3h組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，24h組和正常對照組、3h組及12h組相比均有明顯差異(P＜0.05)；HO-1的表達呈上升趨勢，各時間組相比均無顯著差異(P＞0.05)；HIF-1α的表達呈上升趨勢，12h組與3h組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，24h組和正常對照組、3h組相比均有明顯差異(P＜0.