小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞復(fù)合藻酸鹽異位成骨與成軟骨能力研究.pdf

1、在臨床醫(yī)學(xué)中，因創(chuàng)傷、感染、腫瘤術(shù)后及先天缺陷導(dǎo)致組織缺損的修復(fù)重建，一直是困擾各專業(yè)醫(yī)生的棘手問(wèn)題。在口腔種植學(xué)領(lǐng)域，由于長(zhǎng)期缺牙導(dǎo)致多數(shù)患者術(shù)區(qū)缺乏足夠的骨量，需要術(shù)前植骨。當(dāng)前臨床上使用的自體骨、異體骨移植，以及其它各種組織修復(fù)與重建方法雖然各有優(yōu)缺點(diǎn)。組織工程是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和工程學(xué)的原理，對(duì)病損組織結(jié)構(gòu)、功能的修復(fù)與重建進(jìn)行研究開發(fā)的一門新興科學(xué)。種子細(xì)胞是組織工程的首要因素，骨髓基質(zhì)干細(xì)胞是近年來(lái)研究最熱門的種子細(xì)胞，被認(rèn)為

2、是最有可能用于臨床的種子細(xì)胞之一。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分離BALB/C小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞，經(jīng)過(guò)原代培養(yǎng)和定向誘導(dǎo)后將其復(fù)合藻酸鹽支架材料后植入體內(nèi)觀察異位成骨、成軟骨能力。實(shí)驗(yàn)采取貼壁法獲得骨髓基質(zhì)細(xì)胞，并誘導(dǎo)培養(yǎng)其成骨、成軟骨表型，觀察細(xì)胞形態(tài)變化并進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)、組織學(xué)染色以及分子生物學(xué)鑒定；再?gòu)?fù)合藻酸鹽凝膠，掃描電鏡觀察細(xì)胞與支架材料粘附情況；最后將細(xì)胞一支架復(fù)合體植入裸鼠皮下，于植入后4、8周取材，HE染色、免疫組織化學(xué)染色、R

3、T-PCR檢測(cè)異位形成的骨、軟骨組織。 研究結(jié)果顯示：骨髓基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)過(guò)成骨和成軟骨誘導(dǎo)后可以表達(dá)明顯的成骨和成軟骨表型，掃描電鏡結(jié)果顯示細(xì)胞在藻酸鹽支架內(nèi)良好的貼附和增殖。體內(nèi)動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)，經(jīng)過(guò)成軟骨誘導(dǎo)的BMSCs復(fù)合藻酸鹽后可以形成Col-Ⅱ 免疫組織化學(xué)染色陽(yáng)性的軟骨樣組織；經(jīng)過(guò)成骨誘導(dǎo)的BMSCs復(fù)合藻酸鹽支架后可以形成OCN免疫組化染色陽(yáng)性，類似骨小梁的結(jié)構(gòu)的骨樣組織。而RT-PCR結(jié)果也證實(shí)異位軟骨、骨組織可