小鼠骨髓基質(zhì)細胞復(fù)合藻酸鹽異位成骨與成軟骨能力研究.pdf

1、在臨床醫(yī)學中，因創(chuàng)傷、感染、腫瘤術(shù)后及先天缺陷導(dǎo)致組織缺損的修復(fù)重建，一直是困擾各專業(yè)醫(yī)生的棘手問題。在口腔種植學領(lǐng)域，由于長期缺牙導(dǎo)致多數(shù)患者術(shù)區(qū)缺乏足夠的骨量，需要術(shù)前植骨。當前臨床上使用的自體骨、異體骨移植，以及其它各種組織修復(fù)與重建方法雖然各有優(yōu)缺點。組織工程是應(yīng)用細胞生物學和工程學的原理，對病損組織結(jié)構(gòu)、功能的修復(fù)與重建進行研究開發(fā)的一門新興科學。種子細胞是組織工程的首要因素，骨髓基質(zhì)干細胞是近年來研究最熱門的種子細胞，被認為

2、是最有可能用于臨床的種子細胞之一。 本實驗通過分離BALB/C小鼠骨髓基質(zhì)細胞，經(jīng)過原代培養(yǎng)和定向誘導(dǎo)后將其復(fù)合藻酸鹽支架材料后植入體內(nèi)觀察異位成骨、成軟骨能力。實驗采取貼壁法獲得骨髓基質(zhì)細胞，并誘導(dǎo)培養(yǎng)其成骨、成軟骨表型，觀察細胞形態(tài)變化并進行免疫細胞化學、組織學染色以及分子生物學鑒定；再復(fù)合藻酸鹽凝膠，掃描電鏡觀察細胞與支架材料粘附情況；最后將細胞一支架復(fù)合體植入裸鼠皮下，于植入后4、8周取材，HE染色、免疫組織化學染色、R

3、T-PCR檢測異位形成的骨、軟骨組織。 研究結(jié)果顯示：骨髓基質(zhì)細胞經(jīng)過成骨和成軟骨誘導(dǎo)后可以表達明顯的成骨和成軟骨表型，掃描電鏡結(jié)果顯示細胞在藻酸鹽支架內(nèi)良好的貼附和增殖。體內(nèi)動物試驗證實，經(jīng)過成軟骨誘導(dǎo)的BMSCs復(fù)合藻酸鹽后可以形成Col-Ⅱ 免疫組織化學染色陽性的軟骨樣組織；經(jīng)過成骨誘導(dǎo)的BMSCs復(fù)合藻酸鹽支架后可以形成OCN免疫組化染色陽性，類似骨小梁的結(jié)構(gòu)的骨樣組織。而RT-PCR結(jié)果也證實異位軟骨、骨組織可