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1、目的:本課題旨在研究納米羥基磷灰石/聚酰胺66三維復(fù)合支架材料對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和成骨向分化的影響,了解其作為骨組織工程支架的優(yōu)勢(shì)和局限性,為其制備改進(jìn)和臨床應(yīng)用提供理論支持。 方法:原代分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,接種于該支架上。構(gòu)建簡(jiǎn)易灌注式生物反應(yīng)器,以平面靜態(tài)培養(yǎng)為對(duì)照,在三維靜態(tài)和三維動(dòng)態(tài)灌注兩種條件下礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞.支架復(fù)合體,在不同時(shí)點(diǎn)進(jìn)行掃描電鏡觀察和MTT、堿性磷酸酶活性、鈣素水平的定量測(cè)定。
2、 結(jié)果:靜態(tài)組和動(dòng)態(tài)組的MTT曲線均保持穩(wěn)定緩慢上升而對(duì)照組在第9天以后呈下降趨勢(shì);三組的堿性磷酸酶活性均在第7天達(dá)到峰值,動(dòng)靜兩組區(qū)別不明顯;動(dòng)態(tài)組在14、21天骨鈣素表達(dá)顯著高于靜態(tài)組,靜態(tài)組在7、14、21天骨鈣素水平又高于對(duì)照。掃描電鏡下,有別于靜態(tài)培養(yǎng)中覆蓋多孔表面的細(xì)胞毯,動(dòng)態(tài)培養(yǎng)表現(xiàn)出空間板層狀的立體結(jié)構(gòu)。 結(jié)論:與二維平面培養(yǎng)相比,納米羥基磷灰石/聚酰胺66三維復(fù)合支架材料能在第9天與21天之間保持和促進(jìn)rBM
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