IUGR大鼠IGF2-H19印跡控制區(qū)組蛋白修飾及基因表達相關(guān)性研究.pdf

1、目的：宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR)尤其是生后出現(xiàn)追趕生長（CG）的個體較易發(fā)生成年期不良代謝結(jié)局，包括糖尿病、胰島素抵抗、肥胖癥和心血管疾病等代謝綜合征（MS）。胰島素生長因子（IGF2）是調(diào)控胚胎生長發(fā)育的重要分子并能影響個體出生后的生長發(fā)育，因此推測表觀遺傳包括仔鼠肝臟組織中IGF2/H19印跡控制區(qū)組蛋白修飾可能發(fā)生了改變，從而導(dǎo)致IGF2的表達發(fā)生了改變，并在大鼠的生長追趕及代謝綜合征發(fā)生機制充當(dāng)重要的作用。
　　方法：采用妊

2、娠期持續(xù)限制飲食的方法模擬宮內(nèi)營養(yǎng)不良環(huán)境，至出生后減少限制飲食組每窩仔鼠數(shù)量為5只，正常對照組每組為8只，以構(gòu)建宮內(nèi)發(fā)育遲緩及生后追趕生長的大鼠模型；取新生鼠（0周齡）和8周齡仔鼠肝臟組織，提取RNA,采用Real time PCR檢測目的基因IGF2基因 mRNA的相對表達水平；利用組織進行染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）處理后，采用Real time PCR進行基因表達的定量分析，比較0d、8w對照組及 IUGR組 IGF2/H19印

3、跡控制區(qū)CTCF1、CTCF2、CTCF3和CTCF4組蛋白修飾的變化。
　　結(jié)果：與對照組進行比較，0周齡和8周齡仔鼠IGF2 mRNA的相對表達水平在IUGR組明顯降低，且8周齡IUGR仔鼠IGF2 mRNA的相對表達水平比0周齡明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。在CTCF1、CTCF2和CTCF3區(qū)域，與對照組相比，IUGR組0周齡和8周齡仔鼠的肝臟組織AcH3的富集程度均降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，而對于CTCF4區(qū)域的研究卻發(fā)現(xiàn)

4、IUGR組0周齡仔鼠的乙?；浇档偷?周齡的乙酰化水平卻升高；在 CTCF1、CTCF2、CTCF3和CTCF4四個區(qū)域上，H3K4me3的富集程度在IUGR組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；相反的，H3K9me2的富集程度在IUGR組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。比較IUGR組4個CTCF區(qū)域的AcH3富集程度，發(fā)現(xiàn)8周齡仔鼠比0周齡明顯降低；比較IUGR組個體H3K4me3的富集程度，發(fā)現(xiàn)在4個CTCF區(qū)域，8周齡仔鼠均比0周齡降低

5、；而在CTCF1和CTCF2這兩個區(qū)域，H3K9me2的富集程度表現(xiàn)為8周齡仔鼠高于0周齡，但在CTCF3和CTCF4區(qū)域，8周齡仔鼠比0周齡低。0周齡仔鼠IGF2 mRNA的相對表達水平與CTCF1（AcH3、H3K4me3）、CTCF2（AcH3、H3K4me3）、CTCF3（AcH3、H3K4me3）及CTCF4（AcH3、H3K4me3）的富集程度呈正相關(guān)；與CTCF1、CTCF2、CTCF3及CTCF4的H3K9me2富集程度

6、呈負相關(guān)。8周齡仔鼠IGF2 mRNA的相對表達水平與CTCF1（AcH3、H3K4me3）、CTCF2 H3K4me3、CTCF3（AcH3、H3K4me3）的富集程度呈正相關(guān)；與CTCF1 H3K9me2、CTCF2 H3K9me2、CTCF3 H3K9me2、CTCF4 AcH3、CTCF4 H3K9me2的富集程度呈負相關(guān)；與CTCF2 AcH3及CTCF4 H3K4me3的富集程度無直線相關(guān)。
　　結(jié)論：出現(xiàn)生長追趕的宮