NRAGE抑制胰腺癌和惡性黑色素瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的實驗研究.pdf

1、NRAGE抑制胰腺癌和惡性黑色素瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的實驗研究盡管包括外科和輔助治療手段的提高，但胰腺癌和惡性黑色素瘤患者仍保持較高的病死率，一旦確診，多數(shù)患者已經(jīng)發(fā)生局部侵潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移?？刂颇[瘤轉(zhuǎn)移路徑可能是治愈腫瘤的希望所在。 NRAGE(Neurotrophin Receptor-interacting MAGE homolog)是MAGE(黑色素瘤抗原)家族的一員。大部分MAGE家族的蛋白僅在腫瘤中表達(dá)，而NRAGE卻在發(fā)育早期和

2、成年期的許多組織中都有表達(dá)。近來實驗發(fā)現(xiàn)：在某些類型的腫瘤中NRAGE的表達(dá)量降低，提示NRAGE與腫瘤的形成有關(guān)。許多研究表明：NRAGE在調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和分化過程中起著重要作用。但尚未見NRAGE調(diào)控腫瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移的研究報道。本文系統(tǒng)地研究了NRAGE對胰腺癌和惡性黑色素瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移的影響，在體和離體實驗均證明：NRAGE可以抑制胰腺癌和惡性黑色素瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移，并且初步探討了其中的分子機(jī)制。 具體結(jié)果如下：

3、 1．通過siRNA敲除PANC-1細(xì)胞中的NRAGE基因，觀察細(xì)胞形態(tài)變化，提示該細(xì)胞發(fā)生了上皮向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(EMT)，同時發(fā)現(xiàn)，敲除NRAGE后的PANC-1細(xì)胞E-cadherin和β-catenin蛋白表達(dá)水平降低。細(xì)胞轉(zhuǎn)移試驗證明：敲除NRAGE后的PANC-1細(xì)胞侵襲能力明顯提高。 2．通過細(xì)胞傷口愈合試驗和細(xì)胞轉(zhuǎn)移試驗，過表達(dá)NRAGE的PANC-1細(xì)胞的侵襲和移動能力顯著降低，而且與NRAGE的量呈負(fù)相關(guān)。但是

4、，它的E-cadherin和β-catenin蛋白表達(dá)水平也降低，這出乎我們的意料。另外，我們還發(fā)現(xiàn)：外源性的NRAGE抑制內(nèi)源性NRAGE的表達(dá)。 3．動物實驗證明：過表達(dá)NRAGE的惡性黑色素瘤B16-BL6細(xì)胞不容易發(fā)生肺臟和肝臟的轉(zhuǎn)移，但它對細(xì)胞成瘤無影響。 4．RT-PCR證明：敲除NRAGE后的PANC-1細(xì)胞MMP-2轉(zhuǎn)錄增加，而NRAGE過表達(dá)的PANC-1細(xì)胞MM-2轉(zhuǎn)錄降低，因此，NRAGE可以抑制M