補(bǔ)體C5a對(duì)腎移植排斥反應(yīng)中IL-17產(chǎn)生的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、近年來,我國(guó)每年由于各種原因?qū)е碌男略瞿I功能衰竭病例約200萬(wàn)人,雖然腎移植是治療終末期腎功能衰竭的理想方法,而能否長(zhǎng)期維持移植腎有功能的存活,仍然是亟待解決的重要問題。
　　目前國(guó)內(nèi)外,臨床上普遍采用環(huán)孢素A、他克莫司及雷帕霉素等免疫抑制劑作為腎移植術(shù)后抑制排斥反應(yīng)發(fā)生的藥物。這些抗排斥藥物的作用機(jī)理均是通過非特異性地抑制T細(xì)胞的活化和增殖,來控制排斥反應(yīng)的發(fā)生。雖然在臨床上取得了明顯的效果,但由于是對(duì)所有T細(xì)胞功能的全面抑制,

2、作用缺乏選擇性,副作用大。
　　IL-17由CD4+ T亞群、CD8+T亞群、gd細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等多種細(xì)胞分泌,為重要的促炎因子,可誘導(dǎo)人表皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分泌IL-6、IL-8和G-CSF;促進(jìn)人成纖維細(xì)胞表達(dá)ICAM-1;募集中性粒細(xì)胞和促進(jìn)血管生成?，F(xiàn)有研究認(rèn)為IL-17在器官移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)中有著重要作用。
　　在移植排斥反應(yīng)中,移植抗原與抗體的結(jié)合進(jìn)一步激活補(bǔ)體系統(tǒng)。作為補(bǔ)體系統(tǒng)的樞紐分子,C5被

3、激活后,可裂解形成C5a和C5b。C5a是一種重要的炎癥介質(zhì)和趨化因子,通過與靶細(xì)胞表面C5aR的結(jié)合,發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。盡管補(bǔ)體在移植排斥中的重要作用已有不少報(bào)道,但對(duì)于小分子C5a在臨床移植排斥中的作用機(jī)制并不清楚。
　　目的:
　　探討腎臟移植排斥反應(yīng)發(fā)生中,白細(xì)胞介素-17與補(bǔ)體C5活化產(chǎn)物C5a的表達(dá),以及兩者之間可能的相互調(diào)節(jié)作用。
　　方法:
　?、偈紫韧ㄟ^流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,

4、FCM)比較同種異基因腎移植手術(shù)前后患者外周血細(xì)胞中IL-17+T細(xì)胞的百分率。
　?、诓捎妹嘎?lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)比較同種異基因腎移植手術(shù)前后患者血清補(bǔ)體C5a的水平。
　?、鄄捎妹庖呓M織化學(xué)法比較發(fā)生排斥反應(yīng)腎組織與正常腎組織中,IL-17的表達(dá)和補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5b-9的沉積情況。
　?、苊庖呒?xì)胞化學(xué)法檢測(cè)人腎小管上皮細(xì)胞系HK2細(xì)胞C5aR

5、的表達(dá)。
　?、菝庖呒?xì)胞化學(xué)法和流式細(xì)胞術(shù)比較重組人C5a誘導(dǎo)前后,人腎小管上皮細(xì)胞系HK2細(xì)胞中IL-17產(chǎn)生的差異。
　　結(jié)果:
　?、偻ㄟ^流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)腎臟移植前后患者外周血中IL-17+T細(xì)胞百分率,發(fā)現(xiàn)接受同種異基因腎臟移植患者外周血標(biāo)本中,部分患者術(shù)后3天IL-17+T細(xì)胞百分率較術(shù)前明顯升高。
　?、贓LISA結(jié)果顯示,接受同種異基因腎移植術(shù)后7天時(shí),患者血清C5a水平較術(shù)前有顯著上升。
　

6、?、叟c正常腎臟組織相比,發(fā)生排斥反應(yīng)腎臟組織IL-17的表達(dá)與補(bǔ)體活化產(chǎn)物C5b-9的沉積均明顯增加,且兩者的表達(dá)方式相似,均主要集中于腎小管區(qū)域。
　?、苊庖呒?xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示,人腎小管上皮細(xì)胞系HK2細(xì)胞固有性表達(dá)C5aR。
　?、葜亟M人C5a刺激HK2細(xì)胞48h后,IL-17的表達(dá)水平明顯上調(diào),表明C5a可通過與固有性表達(dá)在腎小管上皮細(xì)胞上的C5aR結(jié)合,直接作用于腎小管上皮細(xì)胞調(diào)節(jié)其IL-17的產(chǎn)生。
　　結(jié)論: