TIRAP和TLR2基因多態(tài)性與結(jié)核分枝桿菌易感性相關(guān)性研究.pdf

1、目的:結(jié)核病是一種致死性傳染性疾病，事實(shí)上每年大約有200萬(wàn)人死于結(jié)核。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)TIRAP的rs595209、rs7932766、rs8177374和rs8177400四個(gè)位點(diǎn)與TLR2的rs5743708和rs3804099兩個(gè)位點(diǎn)基因多態(tài)性，分析它們與結(jié)核病易感性之間的關(guān)系。
　　 方法:采用病例和對(duì)照研究方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。選取在河北省胸科醫(yī)院住院的河北石家莊地區(qū)漢族結(jié)核病患者280例作為活動(dòng)性結(jié)核病例組，選取籍貫為河

2、北石家莊地區(qū)的、與結(jié)核病人密切接觸的漢族醫(yī)生、護(hù)士222例作為隱性感染者;選取在河北省人民醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的河北省石家莊地區(qū)漢族人187例為對(duì)照。采集所有研究對(duì)象的空腹EDTA抗凝靜脈血，并提取血樣基因組DNA。在樣本中測(cè)序檢測(cè)TIRAP與TLR基因中可能存在的基因多態(tài)性，利用多重SNaPshot分析法對(duì)三組研究對(duì)象中TIRAP的4個(gè)SNPs即rs595209，rs7932766， rs8177374，rs8177400和TLR2的2個(gè)

3、SNPs即rs5743708，rs3804099進(jìn)行分型分析，并通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析這些基因的多態(tài)性與結(jié)核病易感性之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:
　　 1、本研究中所有研究對(duì)象均通過(guò)隨機(jī)方式選取的，沒(méi)有對(duì)性別和年齡進(jìn)行控制。三組間性別比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=63.770，P=0.000)，進(jìn)一步做兩兩比較，LTBI組男性所占比例為32.0％，低于對(duì)照組(56.1％)，ATB組男性所占比例為67.5％，高于對(duì)照組(56.

4、1％)和LTBI組(32.0％)，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0167);三組年齡比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=4.160，P=0.016），進(jìn)一步做兩兩比較，LTBI組平均年齡為42.10±12.76，高于對(duì)照（37.73±10.79），其余兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 2、三組研究對(duì)象各基因型頻率觀察值與預(yù)期值經(jīng)X2檢驗(yàn)，均沒(méi)有顯著性差異（均P＞0.05），三組研究對(duì)象均符合Hardy-Weinberg遺

5、傳平衡定律，研究對(duì)象具有代表性。
　　 3、X2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TLR2基因的兩個(gè)SNPs位點(diǎn)，它們的等位基因及基因型在結(jié)核病患者組與正常對(duì)照組之間、結(jié)核病患者組與隱性感染組之間及隱性感染組與正常對(duì)照組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。TIRAP的4個(gè)SNPs位點(diǎn)中，rs8177400無(wú)基因多態(tài)性。rs7932766只存在CC和CT兩種基因型，在結(jié)核病患者組與正常對(duì)照組之間，及結(jié)核病患者組與隱性感染者之間等位基因及基因型分布上的

6、差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但是在隱性感染組與正常對(duì)照組之間等位基因及基因型均有顯著差異（P＜0.05）。與正常對(duì)照組相比，隱性感染組無(wú)論T等位基因還是CT基因型均與結(jié)核易感性相關(guān)(OR=0.22，95％CI=0.06-0.81; OR=0.22，95％CI=0.06-0.80)，說(shuō)明等位基因T及基因型CT為結(jié)核發(fā)病的一個(gè)保護(hù)性因素。
　　 4、進(jìn)一步進(jìn)行多因素方差分析發(fā)現(xiàn)，在控制性別和年齡后，TLR2的rs3804099

7、位點(diǎn)的CC基因型在活動(dòng)結(jié)核組與正常對(duì)照組之間比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CC基因型與結(jié)核易感性相關(guān)(OR=2.04，95％CI=1.04-4.08)，是結(jié)核病發(fā)病的危險(xiǎn)因素。TIRAP的rs7932766在多因素方差分析中，基因型CT仍然為結(jié)核發(fā)病的一個(gè)保護(hù)性因素(OR=0.26，95％CI=0.69-0.97)。
　　 5、經(jīng)單因素和多因素分析，TLR2的rs5743708及TIRAP的rs595209、rs8177

8、374位點(diǎn)的基因型及等位基因分布在各組均未有明顯差異(P＞0.05)，說(shuō)明這3個(gè)位點(diǎn)均不是石家莊市地區(qū)漢人結(jié)核易感因素。rs8177400無(wú)基因多態(tài)性。
　　 結(jié)論:
　　 1、X2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TLR2的rs3804099與結(jié)核易感性無(wú)相關(guān)性?？刂菩詣e和年齡因素后，TLR2的rs3804099的CC基因型與結(jié)核易感性相關(guān)，是石家莊地區(qū)漢人結(jié)核發(fā)病的一個(gè)危險(xiǎn)因素，
　　 2、經(jīng)單因素和多因素分析，TIRAP的rs79