Akt及其下游核轉(zhuǎn)錄因子在胃癌耐藥細胞中表達的研究.pdf

1、目的：通過比較胃癌耐藥細胞株SGC7901/DDP和非耐藥細胞株SGC7901中Akt1及其下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65、FOXO3a表達的變化，探討導致胃癌耐藥的PI3K-AKT通路的調(diào)節(jié)機制，以期為胃癌多藥耐藥的防治提供理論依據(jù)。并通過觀察Akt1及NF-κB、FOXO3a在胃癌組織中的表達,探討其與胃癌臨床病理之關(guān)系。 方法：1. 應用化療藥物順鉑按照0.02-1.0ug/ml濃度梯度遞增誘導胃癌SGC7901細胞株，

2、形成胃癌耐藥細胞株SGC7901/DDP。將其培養(yǎng)在DDP濃度為0.5ug/ml的培養(yǎng)液中以維持其耐藥表型。以非耐藥細胞株SGC7901作對照，應用RT-PCR及Western Blotting分別從mRNA水平及蛋白水平檢測Akt1、NF-κB p65、FOXO3a的表達差異。分析耐藥胃癌細胞中Akt1的變化及其與下游NF-κB、FOXO3a的關(guān)系。 2.取胃癌患者的腫瘤組織標本，制成組織芯片，以非胃癌患者的正常胃粘膜活檢組織

3、為對照，檢測胃癌組織與正常胃粘膜組織中Akt1、NF-κB p65、FOXO3a的表達的差異，并進一步分析胃癌組織中Akt1、NF-κB p65、FOXO3a與臨床病理學特征的關(guān)系，以及Akt1表達與其下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB p65、FOXO3a之間的關(guān)系。 結(jié)果：1. 與胃癌非耐藥細胞株SGC7901相比，胃癌耐藥細胞株SGC7901/DDP中Akt1、NF-κB p65 mRNA和蛋白水平的表達顯著升高（p<0.05），而

4、FOXO3a mRNA和蛋白的表達水平則下降（p<0.05）。2.免疫組織化學研究顯示，胃癌組織的Akt1和NF-κB的陽性表達率顯著高于正常胃粘膜組織，且其表達與腫瘤大小，分化程度，浸潤深度，脈管浸潤顯著相關(guān)；而FOXO3a在胃癌中陽性表達則較正常胃組織顯著降低（p<0.05）。3.胃癌患者的腫瘤組織中Akt1表達與NF-κB表達呈正相關(guān)，而與FOXO3a表達呈負相關(guān)（p<0.05）。 結(jié)論：1. 胃癌耐藥細胞株SGC7901

5、/DDP中Akt1及其下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB表達上調(diào)，而FOXO3a表達則下調(diào)。提示胃癌耐藥的PI3K-AKT通路可能是通過NF-κB的表達上調(diào)、FOXO3a的表達下調(diào)起作用的。2. 胃癌組織中AKT1及NF-κB陽性表達較正常胃組織顯著升高，其表達與腫瘤大小，分化程度，浸潤深度，脈管浸潤顯著相關(guān)；而FOXO3a在胃癌中陽性表達則較正常胃組織顯著降低，提示Akt1及其下游靶蛋白NF-κB和FOXO3a可能參與了胃癌的發(fā)生、發(fā)展，NF-