玉米大斑病菌轉(zhuǎn)錄因子StSte12的結(jié)構(gòu)分析及其下游靶基因的篩選.pdf

1、分類號(hào)：墨壘35：131密級(jí)：公玨單位代碼：學(xué)號(hào)：100862010082玉米大斑病菌轉(zhuǎn)錄因子StStel2的結(jié)構(gòu)分析及其下游靶基因的篩選ThestructureanalysisoftranscriptionfactorStStel2andscreeningofdownstreamtargetgenesofStStel2inSetosphaeriaturcica學(xué)位申請(qǐng)人：張長志指導(dǎo)教師：韓建民教授董金皋教授學(xué)科專業(yè)：植物學(xué)學(xué)位類別：理

2、學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一三年五月二十七日摘要本實(shí)驗(yàn)室在前期研究中已經(jīng)克隆了玉米大斑病菌Fus3／KsslhomologMAPK級(jí)聯(lián)途徑下游的一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子基因StSTEl2，并獲得了3株該基因的不同沉默程度RNAi轉(zhuǎn)化子。本研究在此基礎(chǔ)上利用生物信息學(xué)技術(shù)，明確了StSTEl2在基因組中的位置并解析了StStel2蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征；并在分析釀酒酵母ScStel2轉(zhuǎn)錄因子的下游調(diào)控基因的基礎(chǔ)上，從玉米大斑病菌基因組數(shù)據(jù)庫

3、中篩選得到了ScStel2的同源基因；以玉米大斑病菌StSTEl2基因RNAi轉(zhuǎn)化子為實(shí)驗(yàn)材料，利用RTPCR和RealtimePCR技術(shù)，分析這些基因的表達(dá)規(guī)律，最終確定玉米大斑病菌轉(zhuǎn)錄因子StStel2可能的下游調(diào)控基因。本試驗(yàn)的主要研究結(jié)果如下：1利用生物信息學(xué)方法，確定了玉米大斑病菌StSTEl2基因位于scaffold13正鏈的10617471064127，其ID為105656；該基因的編碼蛋白具有Stel21ike蛋白所特有

4、的保守結(jié)構(gòu)域(STEhomeodomain和ZnFC2H2鋅指結(jié)構(gòu))及空間結(jié)構(gòu)。2利用Westernblotting技術(shù)，分析了玉米大斑病菌在菌絲發(fā)育、分生孢子形成及附著胞形成等不同發(fā)育時(shí)期StStel2蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果表明，Ststel2蛋白在附著胞形成時(shí)期的表達(dá)量最大。3通過搜索釀酒酵母基因組數(shù)據(jù)庫，得到了釀酒酵母中受轉(zhuǎn)錄因子ScStel2調(diào)控的下游靶基因；進(jìn)一步查詢玉米大斑病菌基因組數(shù)據(jù)庫，獲得了上述所有基因的同源基因；通過對(duì)