自噬在卵巢癌SKOV3細(xì)胞體外化療中的發(fā)展變化.pdf

1、目的:5-氟尿嘧啶(5-FU)作為目前臨床最常用的抗腫瘤藥物之一，通過抗代謝作用、干擾DNA的合成代謝，抑制腫瘤細(xì)胞的生長。但其抗癌機(jī)制較為復(fù)雜多樣，具體機(jī)制尚未研究明確。有關(guān)5-FU對人卵巢癌SKOV3細(xì)胞的自噬作用的報道為數(shù)不多。本實驗擬研究化療藥物5-FU對卵巢癌細(xì)胞SKOV3自噬的誘導(dǎo)作用與機(jī)制以及巴弗洛霉素A1(Bafilomycin A1)對5-氟尿嘧啶（5-FU）作用下的卵巢癌細(xì)胞SKOV3自噬的抑制作用及其增強(qiáng)化療敏感性

2、的可能機(jī)制。
　　方法:應(yīng)用吖啶橙染色、間接免疫熒光技術(shù)觀察50μmol/L5-FU作用于卵巢癌SKOV3處理48 h以及100nmol/L Bafilomycin A1給藥1h后加入50μmol/L5-氟尿嘧啶(5-FU)處理48h，對卵巢癌細(xì)胞SKOV3自噬過程的影響;并通過Western blotting檢測5-FU對SKOV3細(xì)胞中微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)和自噬相關(guān)蛋白Beclin1表達(dá)水平的影響和巴弗洛霉素A1(Ba

3、filomycin A1)對SKOV3細(xì)胞中微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)及自噬相關(guān)蛋白Beclin1表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:5-FU作用后SKOV3細(xì)胞產(chǎn)生明顯的酸性區(qū)域，LC3定位的熒光亮點(diǎn)增多，細(xì)胞內(nèi)Beclin1和LC3蛋白表達(dá)量也顯著增加;巴弗洛霉素A1(Bafilomycin A1)給藥1h后加入50μmol/L5-氟尿嘧啶(5-FU)處理48h后卵巢癌SKOV3細(xì)胞產(chǎn)生的紅色酸性區(qū)域明顯減少，LC3定位的熒光亮度減弱，