6，8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌Hep G2細(xì)胞凋亡研究.pdf

1、南華大學(xué)碩士學(xué)位論文6，8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡研究姓名：夏紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：曹建國2007050136，8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡研究6，8二三氟甲基7乙酰氧基白楊素活化PPARγ誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡研究中文摘要中文摘要目的目的：觀察68二三氟甲基7乙酰氧基白楊素(dFMAChR)抑制體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細(xì)胞的

2、生長和誘導(dǎo)凋亡作用；用人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型治療實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)dFMAChR在體抗肝癌的有效性；并初步探討其抗肝癌作用機(jī)制，為尋找具有開發(fā)前景的肝癌治療活性新化學(xué)實(shí)體提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法方法：MTT比色法測(cè)定dFMAChR對(duì)體外培養(yǎng)人肝癌HepG2細(xì)胞和人胚肝L02細(xì)胞增殖的影響，評(píng)價(jià)其對(duì)人肝癌細(xì)胞作用選擇性；平皿克隆形成法及軟瓊脂克隆形成法檢測(cè)dFMAChR對(duì)體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞的錨定依賴性及非錨定依賴性生長能力的影響；Hoe

3、chst染色熒光顯微鏡觀察dFMAChR誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變；PI染色流式細(xì)胞計(jì)定量分析（FCM）法檢測(cè)dFMAChR對(duì)HepG2細(xì)胞誘導(dǎo)凋亡程度；DNA瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)dFMAChR誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡的典型DNA“梯形”條帶；建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型，評(píng)價(jià)dFMAChR在體的抗肝癌活性；HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察人肝癌移植瘤組織形態(tài)學(xué)變化；TUNEL法檢測(cè)dFMAChR誘導(dǎo)人肝癌裸鼠移植瘤細(xì)胞凋亡作用

4、；應(yīng)用Westernblot檢測(cè)dFMAChR對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白PPARγ、NFκB、Bcl2、Bax、Caspase3表達(dá)和活性的影響。結(jié)果：結(jié)果：MTT比色法結(jié)果顯示，dFMAChR(3.0、10.0、30.0M)和其先導(dǎo)化合物白楊素(ChR30.0M)及陽性對(duì)照藥物氟尿嘧啶(5FU30.0M)分別處理人肝癌HepG2細(xì)胞48小時(shí)，其增殖相對(duì)抑制率分別為30.84%54.04%62.26%，52.35%和61.48%；dF