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文檔簡介
1、脂質(zhì)沉積是指肝、胰或者脂肪組織中脂滴數(shù)量顯著增多且聚集。脂質(zhì)異位沉積對骨骼肌、胰島β細胞、肝臟等均有一定的脂毒性作用,并且與糖尿病、脂肪肝、高脂血癥等疾病發(fā)生密切相關(guān)?,F(xiàn)有的降脂藥物均具有一定的副作用及不良反應(yīng)。作為藥食同源的美味佳果,櫻桃富含多種活性營養(yǎng)成分,其中花色苷含量可達4-450mg/100g鮮重。櫻桃花色苷有抗氧化、預防心血管疾病以及降脂減肥等功效,可降低膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平
2、,提高載脂蛋白(ApoA)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)表達水平。因此,從櫻桃中分離制備花色苷并研究其降脂功效具有重要意義。
本課題從櫻桃中提取櫻桃花色苷并對櫻桃花色苷的組分及總黃酮、總多酚含量進行測定并分析了櫻桃花色苷的抗氧化活性及其對細胞脂質(zhì)沉積的抑制改善作用,探討了細胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細胞脂質(zhì)沉積中的作用。課題主要研究結(jié)果如下:
1.分離純化所得的櫻桃花色苷經(jīng)HPLC組分鑒定發(fā)現(xiàn)其主要成分矢車菊素-
3、3-葡萄糖苷、矢車菊素-3-蕓香糖苷、花葵素-3-葡萄糖苷。運用DPPH、ATBS等體外抗氧化實驗、細胞實驗結(jié)合熒光探針對櫻桃花色苷的抗氧化活性進行評價分析證實了櫻桃花色苷有較強的體外抗氧化能力,且對丙烯酰胺(AA)誘導LO2細胞形成的氧化應(yīng)激模型有較好的保護作用。
2.利用油酸(OA)孵育誘導HepG2、LO2細胞建立的細胞脂肪沉積模型評價櫻桃花色苷對細胞脂質(zhì)沉積的抑制改善作用,證實櫻桃花色苷對HepG2、LO2細胞脂質(zhì)沉積
4、有顯著改善作用。櫻桃花色苷可顯著降低細胞甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)含量水平。
3.結(jié)合透射電鏡、免疫熒光等實驗進一步探討細胞自噬在櫻桃花色苷抑制改善細胞脂質(zhì)沉積中的作用,發(fā)現(xiàn)櫻桃花色苷可通過促進細胞自噬體形成,上調(diào)自噬相關(guān)蛋白LC3、Atg5、Beclin1表達水平,下調(diào)P62的表達水平進一步緩解抑制HepG2、LO2脂質(zhì)沉積作用,櫻桃花色苷可下調(diào)脂肪酸合成相關(guān)蛋白FA
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