絲瓜傷流液的抗氧化及對(duì)細(xì)胞增殖作用研究.pdf

1、本文以絲瓜傷流液、其濃縮液和冷凍粉為原料,探討了絲瓜傷流液的理化性質(zhì)、體外抗氧化活性、對(duì)表皮細(xì)胞的增殖影響及其安全性評(píng)價(jià),進(jìn)一步開(kāi)發(fā)出其含片,優(yōu)化其配方。主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　絲瓜傷流液的理化性質(zhì)及體外抗氧化活性。首先,研究其主要理化性質(zhì),其結(jié)果為:絲瓜傷流液的pH值為6.42,固形物含量為0.4 g/L,總酸含量(以檸檬酸計(jì))為7.86mg/L,無(wú)機(jī)鹽為0.32g/L,總糖含量為11.213 mg/L,多糖含量為4.054μg

2、/L。還原糖、蛋白質(zhì)、游離氨基酸均未檢測(cè)出。然后,采用GC-MS對(duì)其所含有機(jī)成分進(jìn)行分析,結(jié)果為:含有4種烷類(lèi),4種酮類(lèi),3種醛類(lèi),3種酚類(lèi),3種胺類(lèi)和1種酸類(lèi)物質(zhì)。最后,研究經(jīng)過(guò)不同條件(4、25、50、75及100℃處理4h)處理后,不同濃度(20、40、60、80、100％)的絲瓜傷流液對(duì)·OH和DPPH的清除能力及其還原能力,結(jié)果為:原液對(duì)·OH清除率為63.4%;室溫下敞口放置50h,清除能力接近0,起作用的物質(zhì)可能為3,4-

3、二烯-2-庚酮;原液對(duì) DPPH清除能力為46.7%,室溫下敞口放置75h,清除能力接近0,在4℃清除能力最強(qiáng),起作用的物質(zhì)可能為3-甲基-1,2-鄰苯二酚;還原能力在4℃時(shí)最高,其中起還原作用的物質(zhì)可能為3,4-二烯-2-庚酮和正戊醛。綜合分析,絲瓜傷流液中的抗氧化物質(zhì)可能為3,4-二烯-2-庚酮、3-甲基-1,2-鄰苯二酚和正戊醛,冷藏保存的原液的體外抗氧化能力最高。
　　絲瓜傷流液對(duì)人永生化細(xì)胞(HaCAT)增殖及其對(duì)細(xì)胞

4、SOD、GSH-Px活性的影響。將HaCAT消化培養(yǎng)48h作用,待細(xì)胞傳代到對(duì)數(shù)期,長(zhǎng)滿(mǎn)瓶壁的80-90%時(shí),即可進(jìn)行下面的試驗(yàn)。首先,采用MTT試驗(yàn)測(cè)定在不同條件(-20、4、25、50、75及100℃處理4h,125℃加熱處理30 min)下,絲瓜傷流液(1倍、2倍、3倍、5倍及6倍濃縮液)對(duì) HaCAT細(xì)胞增殖的影響。然后,研究絲瓜傷流液對(duì)細(xì)胞SOD、GSH-Px活性的影響。結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,溫度對(duì)細(xì)胞及其細(xì)胞SOD、GSH

5、-Px活性影響的順序皆為:4>25>-20>50>75>100>125℃。絲瓜傷流液促進(jìn)HaCAT細(xì)胞增殖,并且通過(guò)增加SOD和GSH-Px等抗氧化酶的活性,從而降低活性氧水平,起到抗氧化的作用,起主要作用的物質(zhì)可能為3-甲基-1,2-鄰苯二酚和3,4-二烯-2-庚酮。并且,在4℃下冷藏的4倍絲瓜傷流液濃縮液抗氧化效果最好。
　　絲瓜傷流液的安全性評(píng)價(jià)。通過(guò)對(duì)白化豚鼠的皮膚急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn),多次皮膚刺激性試驗(yàn),皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)和皮

6、膚光毒性試驗(yàn),對(duì)絲瓜傷流液進(jìn)行了安全性評(píng)價(jià)研究。急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)中,絲瓜傷流液的20倍濃縮液,對(duì)完整皮膚無(wú)毒;多次皮膚刺激性試驗(yàn)表明,20倍濃縮液對(duì)豚鼠完整皮膚的刺激強(qiáng)度平均積分均值為0,即對(duì)完整皮膚無(wú)毒性;皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)表明,豚鼠的皮膚經(jīng)過(guò)20倍濃縮液處理24和48h后,其完整皮膚致敏率為0,即豚鼠完整皮膚無(wú)致敏性;光毒性試驗(yàn)表明,20倍濃縮液不引起豚鼠皮膚光毒性。因此,絲瓜傷流液對(duì)皮膚無(wú)毒、無(wú)刺激性和無(wú)致敏性。
　　絲瓜傷流

7、液含片的工藝研究。以絲瓜傷流液為主要原料,玫瑰花、白砂糖、葡萄糖、淀粉、奶粉等為輔料,開(kāi)發(fā)出一種純天然含片。首先,以感官指標(biāo)為評(píng)價(jià)指標(biāo),通過(guò)單因素試驗(yàn),確定白砂糖、檸檬酸、玫瑰花、絲瓜傷流液、淀粉和奶粉的添加量。在此基礎(chǔ)上,以絲瓜傷流液、白砂糖與葡萄糖的比例、淀粉和麥芽糊精的比例、奶粉為因素,以口感、風(fēng)味、色澤和組織狀態(tài)為指標(biāo),通過(guò)四因素三水平的正交試驗(yàn),優(yōu)化其主要原輔料的配方,結(jié)果為:絲瓜傷流液20%、玫瑰花3%,淀粉20%、麥芽糊精