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文檔簡介
1、該實驗室分別制備欖香稀復合瘤苗抗原(H<,TA>)與卡介苗HSP70(HSP70<,BCG>0),構建H<,TA>-HSP70<,BCG>復合物,免疫小鼠后對H<,TA>的攻擊具有明顯的保護效應.該實驗用H<,TA>-HSP70<,BCG>在外沖擊DC,觀察H<,TA>-HSP70<,BCG>對DC的沖激作用及其抗原提呈功能的影響,探討腫瘤抗原-HSP70<,BCG>瘤苗誘導抗瘤免疫的機制.方法:無菌取小鼠臟、骨髓制成細胞懸液,破紅細胞
2、,用含有GM-CSF和IL-4(濃度為100ng/ml)的1640培養(yǎng)基調成所需濃度2*10<,7>ml.37℃,5﹪CO<,2>培養(yǎng)2個小時.洗掉不黏附細胞后黏附細胞終結培養(yǎng)16-18小時.將培養(yǎng)的粘附細胞用1640培養(yǎng)基(不含血清)沖洗,洗出半粘附細胞,即富含樹突狀細胞的細胞組分簡稱突狀細胞.正常小鼠脾、骨髓DC在體外用H<,TA>-HSP70<,BCG>、H<,TA>、HSP70<,BCG>進行刺激繼續(xù),培養(yǎng)3天.用MTT法測DC
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