肝癌抗原肽-HSP70復(fù)合物修飾樹(shù)突狀細(xì)胞增強(qiáng)抗肝癌作用初步研究.pdf

1、目的：本研究構(gòu)建肝癌抗原肽-熱休克蛋白復(fù)合物修飾樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)，觀察這種修飾的DC細(xì)胞表型及其分泌細(xì)胞因子的變化，進(jìn)一步觀察其在體外的抗腫瘤作用。 方法：從H22肝癌細(xì)胞中提取腫瘤抗原肽，并在體外與熱休克蛋白70(Hsp70)進(jìn)行結(jié)合；采用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)rmGM-CSF、rmIL-4誘導(dǎo)的小鼠骨髓細(xì)胞，體外獲取大量的DC，用HSP-70抗原肽復(fù)合物刺激DC，取上清液，測(cè)細(xì)胞因子IL-10，IL-12含量，并用流式細(xì)胞儀分

2、析DC表面分子。 結(jié)果：DC體外誘導(dǎo)培養(yǎng)成功，HSP70-H22復(fù)合物可使DC成熟，DC表面分子CD40，CD80在HSP70-H22復(fù)合物修飾DC組表達(dá)較單純DC組有顯著性增高(P＜0.01)；10ug/ml，20ug/ml組之間相比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；三組之間CD11c無(wú)差異性(P＞0.05)。Hsp70-H22抗原肽(10ug)修飾的DC組的細(xì)胞因子IL-12明顯高于單純DC組(P＜0.01)，Hsp70-Ht2

3、2抗原肽(20ug)修飾的DC組的細(xì)胞因子IL-12也明顯高于單純DC組(P＜0.01)，Hsp70-Ht22抗原肽(10ug)和Hsp70-H22抗原肽(20ug)相比具有顯著性差異(P＜0.01)；Hsp70-H22抗原肽修飾的DC組上清中，IL-10的含量明顯下降，以Hsp70-Ht22抗原肽修飾的DC組(20ug)上清中含量最少與單純DC組相比有顯著性差異(P＜0.01)，Hsp70-H22抗原肽修飾的DC組(10ug)與單純D