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文檔簡介
1、目的:探討人胎膜體外孵育的方法和感染引發(fā)早產(chǎn)的可能機(jī)制及N-乙酰半胱氨酸(NAC)預(yù)防感染引發(fā)早產(chǎn)的可行性,為進(jìn)一步研究胎膜的結(jié)構(gòu)和功能,以及探討預(yù)防和治療早產(chǎn)的藥物提供一定的理論依據(jù)。 方法:取20例單胎足月?lián)衿谄蕦m產(chǎn)孕婦(無妊娠合并癥、并發(fā)癥,也無臨產(chǎn)征兆,剖宮產(chǎn)指征為巨大兒臀位、頭盆不稱、疤痕子宮及社會因素)的胎膜在體外進(jìn)行孵育,共72小時,孵育48小時后,一部分胎膜給予細(xì)菌內(nèi)毒素脂多糖(LaLipopolysacchar
2、ide,LPS)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)干預(yù)24小時。分成五組:0小時組(取下后未經(jīng)孵育的胎膜),24小時組,48小時組,72小時LPS組,72小時LPS+NAC組。孵育結(jié)束后,首先評價各組體外孵育胎膜的存活力,然后應(yīng)用免疫組織化學(xué)和逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)分別測定五組胎膜的基質(zhì)金屬蛋白酶-9(
3、matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及金屬蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitot of metalloproteinase-1,TIMP-1)的蛋白和轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)變化,最后比較LPS組和LPS+NAC組MMP-9/TIMP-1比值的變化。 結(jié)果:1、①孵育中的胎膜肉眼及光學(xué)顯微鏡觀察:各組孵育的胎膜組織生長良好,新鮮如初,換液時各培養(yǎng)孔中的培養(yǎng)液均由櫻桃紅色變成淡橙色,偶見部分胎膜組織
4、邊緣有少量細(xì)胞生長。②蘇木精-伊紅(HE)染色觀察:各組細(xì)胞的形態(tài)良好,胞膜完整,無皺縮,胞核無碎裂。③各組體外孵育胎膜的存活力:24小時組、48小時組、72小時LPS組、72小時LPS+NAC組分別為87﹪±1.9﹪,85﹪±1.3﹪,83﹪±1.6﹪,82﹪±1.2﹪,兩兩比較無顯著性差異(P>0.05)。2、MMP-9在蛋白和轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá):0小時和48小時組的表達(dá)微弱,24小時組的表達(dá)較前兩組增強(qiáng)(P<0.05),72小時LPS
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