內(nèi)皮祖細胞與噪音性耳聾耳蝸損傷的關系.pdf

1、目的:
　　 1、建立噪聲導致的內(nèi)耳損傷的動物模型，在噪聲性耳聾的動物模型上觀察聽功能的變化、內(nèi)耳毛細胞的損傷情況，建立內(nèi)耳損傷修復的研究平臺。
　　 2、觀察外周血EPCs的變化和耳蝸血管紋中VEGF、iNOS在噪聲暴露后表達變化，闡述噪聲性耳聾的耳蝸組織損傷與修復過程中的發(fā)病機理。
　　 3、通過干預內(nèi)源性EPCs，探討對于噪聲性耳聾耳蝸損傷的預防和治療采取的措施。
　　 方法:
　　 取健康

2、體重約250g～300g成年SD大鼠應用118±1dBSPL白噪聲持續(xù)暴露4小時建立噪聲性耳聾模型，實驗分組為:對照組:未進行噪聲暴露;噪聲暴露即刻組:噪聲暴露后即刻檢測;噪聲暴露1天組:噪聲暴露后1天檢測;噪聲暴露3天組:噪聲暴露后3天檢測;噪聲暴露7天組:噪聲暴露后7天檢測，;噪聲暴露14天組:噪聲暴露后14天檢測;各組均為10只;將試驗分為兩部分，一為單純噪聲暴露對耳蝸損傷修復的影響，二為干預內(nèi)源性EPCs后噪聲暴露對耳蝸損傷修復

3、的影響。SD大鼠根據(jù)噪聲暴露后即刻組、1天組、3天組、7天組和14天組的分組分別檢測各組大鼠的ABR聽閾改變、通過Fillo密度梯度離心法獲得單個核細胞流式細胞儀鑒定SD大鼠外周血中EPCs數(shù)量、通過Western印記和耳蝸冰凍切片免疫組化觀察耳蝸血管紋VEGF、iNOS和CD34的表達變化，同時對噪聲暴露后的耳蝸行掃描電鏡觀察。應用EPO皮下注射提高內(nèi)源性EPCs數(shù)量、半胱氨酸飼料喂養(yǎng)制備內(nèi)源性EPCs數(shù)量降低的模型和NS皮下注射，分

4、別觀察SD大鼠噪聲暴露后即刻組、1天組、3天組、7天組、和14天組ABR聽閾改變。
　　 結(jié)果:
　　 1、噪聲暴露后即刻組ABR閾值為最高，其聽閾為86.67±6.85dBSPL，聽力損傷最為明顯，屬于TTS期;噪聲暴露后7天和14天ABR閾值部分恢復，閾值降低，屬于PTS期，其聽閾分別為為56.18±5.29 dBSPL和57.92±6.20dBSPL;
　　 2、對各組外周血中的EPCs進行測定，觀察到EP

5、Cs于噪聲暴露后1天時最高，數(shù)值為91.40±8.13/20萬個單核細胞;噪聲暴露后14天時EPCs恢復接近正常水平，數(shù)值為29.00±14.56/20萬個單核細胞;
　　 3、免疫組化及Western印記表明噪聲暴露后1天VEGF和iNOS出現(xiàn)高峰，噪聲暴露后即刻組表達最低，CD34于噪聲暴露后3天和7天達到高峰;4、通過干預內(nèi)源性EPCs，EPCs升高組對于聽力的保護作用明顯高于EPCs抑制組。
　　 4、EPCs在

6、內(nèi)耳損傷后的修復過程中，有促進血管生成，改善內(nèi)耳微環(huán)境的作用，降低EPCs可以導致聽力較為嚴重的下降，提高內(nèi)源性EPCs的釋放，可以保護耳蝸減輕噪聲對耳蝸的損傷加快耳蝸損傷后的恢復。
　　 結(jié)論:
　　 1、噪聲性耳聾最終可導致耳蝸損傷，隨著時間改變外周血中EPCs的數(shù)量也發(fā)生改變;
　　 2、VEGF、iNOS參與噪聲性耳聾損傷與修復的各個階段，VEGF和EPCs在噪聲損傷的耳蝸血管修復的不同階段均發(fā)揮作用;<