EGCG誘導(dǎo)人胃癌MGC-803細(xì)胞G-,1-期阻滯及其分子機(jī)制.pdf

1、目的：觀察表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(Epigallaocatechin-3-gallate,EGCG)對(duì)人胃癌MGC-803細(xì)胞增殖的影響，初步探討其抑制腫瘤細(xì)胞增殖的分子機(jī)制?！　》椒ǎ后w外培養(yǎng)人胃癌MGC-803細(xì)胞系細(xì)胞，采用MTT比色法檢測(cè)EGCG對(duì)MGC-803細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用；應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析EGCG對(duì)MGC-803細(xì)胞周期分布的影響；使用免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫印跡等方法觀測(cè)EGCG對(duì)MGC-803細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影

2、響?！　〗Y(jié)果：MTT比色結(jié)果顯示EGCG能呈濃度依賴性抑制MGC-803細(xì)胞增殖，不同濃度EGCG(20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL)處理MGC-803細(xì)胞48h后，其細(xì)胞增殖抑制率分別為21.7％、32.8％、52.5％、61.3％、66.5％，與空白對(duì)照組比較均有顯著性差異(P＜0.05)。IC50=58.60μg/mL?！　×魇郊?xì)胞術(shù)分析結(jié)果提示：EGCG誘導(dǎo)人胃癌MGC-803

3、細(xì)胞G1期阻滯。隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，誘導(dǎo)周期阻滯的效應(yīng)越明顯。相同時(shí)間處理組，不同濃度處理與空白對(duì)照相比均發(fā)生了G1期阻滯。其中長(zhǎng)時(shí)間、較低劑量組(40μg/mL、60μg/mL，48h)周期阻滯效果較為顯著。而短時(shí)間(24h)處理組中，各濃度之間誘導(dǎo)周期阻滯效應(yīng)無(wú)顯著差異?！　∶庖呒?xì)胞化學(xué)圖像定量分析顯示：經(jīng)EGCG(60μg/mL，48h)處理后，人胃癌MGC-803細(xì)胞中CyclinE、p53、c-Myc蛋白陽(yáng)性率較未處理組顯著

4、降低(P＜0.05)，而p21WAF1蛋白表達(dá)增強(qiáng)(P＜0.05)?！　∶庖哂≯E結(jié)果顯示：EGCG能下調(diào)Erk1/2蛋白的磷酸化水平，其作用與濃度和作用時(shí)間相關(guān)。EGCG能下調(diào)Rb蛋白磷酸化水平，其調(diào)節(jié)作用與濃度有關(guān)。結(jié)論：1.EGCG對(duì)體外培養(yǎng)的人胃癌MGC-803細(xì)胞系細(xì)胞具有抑制增殖作用，呈濃度依賴性；2.EGCG抑制MGC-803細(xì)胞增殖作用與誘導(dǎo)細(xì)胞周期G1期阻滯有關(guān)；3.EGCG通過(guò)抑制Erk1/2磷酸化，下調(diào)Cyclin