大豆bHLH04G和bHLH06G轉錄因子的原核表達研究及對皂苷合成和結瘤固氮的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、轉錄因子可以和啟動子互作影響基因表達，對基因有重要的調(diào)控作用，bHLH家族轉錄因子是第二大轉錄因子。本實驗圍繞大豆中bHLH04G、bHLH06G兩個轉錄因子對于皂苷合成和固氮結瘤的影響展開研究。β-香樹脂醇合成酶是大豆皂苷合成的第一個關鍵酶，本團隊竇富強同學用酵母單雜交篩選到與其互作的兩個轉錄因子bHLH04G和bHLH06G。大豆是重要的油料作物，其代謝調(diào)控的研究對于改良大豆品質性狀有著重要的意義。
　　本實驗對這兩個基因分別

2、構建原核表達載體進行原核表達，發(fā)現(xiàn)這兩個蛋白均主要形成包涵體，嘗試不同的誘導條件并更換載體后，蛋白仍主要形成包涵體。此外，構建RNAi載體培養(yǎng)轉基因大豆發(fā)根來研究這兩個轉錄因子對于皂苷合成和固氮結瘤的影響。通過對轉基因發(fā)根結瘤數(shù)統(tǒng)計和檢測結瘤相關基因表達情況，發(fā)現(xiàn)將這兩個基因分別沉默掉以后，結瘤數(shù)均顯著減少，結瘤相關基因表達量均降低。同時檢測轉基因發(fā)根皂苷合成關鍵基因AMS表達情況并提取皂苷檢測皂苷含量和成分的變化，發(fā)現(xiàn)將這兩個基因沉默

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