脂聯(lián)素及其受體在大腸癌組織中的表達(dá)及對(duì)HT-29細(xì)胞增殖和遷移的影響.pdf

1、脂聯(lián)素(ADP)是脂肪細(xì)胞分泌的一種脂肪細(xì)胞因子，由Scherer等于1995年首先從鼠的脂肪細(xì)胞分離出來(lái)，1999年Arita等將其命名為脂聯(lián)素。因?yàn)橹?lián)素是一種脂肪細(xì)胞因子，所以開(kāi)始的研究集中于其對(duì)肥胖和糖尿病的作用方面。研究顯示脂聯(lián)素血漿濃度決定于腹部脂肪含量，脂聯(lián)素可能是聯(lián)系腹型肥胖、胰島素抵抗及致動(dòng)脈粥樣硬化血脂譜中的內(nèi)在因素。后來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素水平與一些腫瘤具有相關(guān)性，臨床流行病學(xué)研究資料發(fā)現(xiàn)，低脂聯(lián)素水平是增加患大腸癌、

2、乳腺癌、胃癌和前列腺癌的危險(xiǎn)性的獨(dú)立因素，同時(shí)脂聯(lián)素受體的低表達(dá)也與大腸癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)。我們運(yùn)用免疫組化實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)脂聯(lián)素及脂聯(lián)素受體在大腸癌組織中的表達(dá)情況，并應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證脂聯(lián)素對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞的增殖的影響，運(yùn)用“劃痕”法遷移實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證脂聯(lián)素對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞的遷移的影響，運(yùn)用流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)脂聯(lián)素對(duì)結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞周期的影響。
　　 目的:研究脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素在大腸癌組織中的表達(dá)情況及意義，人脂聯(lián)素重組體對(duì)人

3、結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞體外增殖及遷移能力的影響。
　　 方法:1、應(yīng)用免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)77例大腸癌組織中脂聯(lián)素受體與脂聯(lián)素的表達(dá)。2、將HT-29細(xì)胞分為對(duì)照組和脂聯(lián)素重組體實(shí)驗(yàn)組(2.5，5，10，15μg/mL)，用脂聯(lián)素重組體作用一定時(shí)間后，分別以MTT法、細(xì)胞劃痕法和流式細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)脂聯(lián)素重組體對(duì)大腸癌細(xì)胞增殖、遷移能力、細(xì)胞周期的影響。
　　 結(jié)果:免疫組化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，大腸癌組織中脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素表達(dá)

4、較正常大腸組織明顯減少，AdipoR1、AdipoR2和ADP的表達(dá)都與浸潤(rùn)深度相關(guān)(P＜0.05);AdipoR1及ADP陽(yáng)性表達(dá)率與浸潤(rùn)深度T分級(jí)呈顯著負(fù)相關(guān)性（r=-0.237P=0.038，r=-0.469P=0.000）。AdipoR1、AdipoR2及ADP的表達(dá)與大腸癌有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05);且AdipoR1及ADP陽(yáng)性表達(dá)率與淋巴轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.237P=0.038，r=-0.231P=0.043）。

5、AdipoR1的表達(dá)與有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)(P＜0.05);AdipoR2及ADP的表達(dá)與大腸癌淋巴轉(zhuǎn)移無(wú)明顯相關(guān)性。
　　 通過(guò)MTT測(cè)定，發(fā)現(xiàn)脂聯(lián)素重組體能顯著降低HT-29細(xì)胞體外增殖和遷移能力(P＜0.01)，此作用具有濃度依賴性，從而進(jìn)一步證明了脂聯(lián)素可以抑制大腸癌細(xì)胞的惡性增殖;劃痕試驗(yàn)證實(shí)，脂聯(lián)素抑制大腸癌細(xì)胞的遷移，并且與濃度大小成正比，證明脂聯(lián)素可以降低大腸癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力，抑制腫瘤細(xì)胞遷移，從而抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移

6、;流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果表明脂聯(lián)素重組體作用后G1期細(xì)胞比例增加，而S期細(xì)胞比例降低，各種濃度組與對(duì)照組比較差異均有顯著性(P＜0.01)，且隨著脂聯(lián)素重組體作用濃度增加G1期細(xì)胞比例越高，而S期細(xì)胞比例越低，表明脂聯(lián)素可以將大腸癌細(xì)胞分裂阻滯在G1期，抑制細(xì)胞分裂增殖。
　　 結(jié)論:脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素在大腸癌組織中的表達(dá)較正常大腸組織顯著減少，兩者的表達(dá)與大腸癌的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移呈明顯負(fù)相關(guān)性，脂聯(lián)素與脂聯(lián)素受體的表達(dá)呈正相關(guān);脂聯(lián)素可