共價連接的抗人大腸癌雙價單鏈抗體基因的構(gòu)建及表達.pdf

1、’7分類號墅塑L!』單位代碼：10159學號：200321024⑨幸回鏊升太拳碩士學位論文題目：共價連接的抗人大腸癌雙價單鏈抗體基因的構(gòu)建及表達ConstractionarIdExpressionofCovalendyLinkedBivaIentSingle—chainAntibodiesagainstHumanColorectalCarcinoma研究生：——芒量盤—一導師：—土壁一學科專業(yè)：—魚墮生鹽芏論文課題起止時間：!唑主118

2、=型叢主!目論文完成時間：—墊堂』立衛(wèi)共價連接的抗人大腸癌雙價單鏈抗體基因的構(gòu)建及表達刖旨大腸癌是常見的惡性腫瘤之一，目前其發(fā)病率在我國居第三位，死亡率呈逐年上升趨勢，因此探討有效的診斷和治療手段是大腸癌研究的重要課題。利用單克隆抗體作為載體的大腸癌導向診斷和治療已經(jīng)取得了一定進展，但是完整抗體由于分子量較大，組織穿透能力差，含有的Fc段易造成體內(nèi)非特異性分布，并且絕大多數(shù)為鼠源性，對人體有較強的免疫原性，因而在顯像診斷及治療應(yīng)用中一直

3、未能取得滿意的效果。利用基因工程技術(shù)改造而獲得的小分子抗體，如Fab和scFv(single—chainFv)等，分子量小(Mr25～30kDa)，穿透力強，具有快速的血漿清除率；不含F(xiàn)c段，免疫原性低，可明顯提高對腫瘤組織的特異性。但由于只有一個抗原結(jié)合位點，其親和活性大大降低；SY子量過小，在體內(nèi)及靶組織滯留的時間短，易在腎臟清除，使絕大部分抗體還未在腫瘤組織充分發(fā)揮作用就已從體內(nèi)清除，因而極大限制了其在腫瘤診斷及治療中的應(yīng)用。近年

4、來，人們用scFv為元件構(gòu)建出來的基因工程雙價抗體分子因具有類似于完整抗體IgG的雙價結(jié)合位點，與scFv相比其抗體的親和性大大提高，適中的分子量(Mr55～80kDa)既保證了抗體在腫瘤組織的良好穿透能力，又大大改善了scFv在體內(nèi)清除過快的缺點，在腫瘤的顯像和治療方面顯示出良好的應(yīng)用前景。ND一1是本室宋今丹于1983年以人大腸癌細胞系CCL一187為免疫原制備的鼠抗人大腸癌單克隆抗體，已進行的近千例臨床病理檢測顯示，該單抗對高中分