外源性降鈣素通過上調(diào)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞β3表達促進胚泡植入.pdf

1、目的：胚泡著床障礙是導(dǎo)致輔助生殖技術(shù)臨床妊娠率低的最主要原因之一。有研究表明降鈣素特異表達于植入窗期子宮內(nèi)膜組織中,并在胚泡植入過程中起到重要作用。本研究將探討外源降鈣素(calcitonin,CT)通過影響子宮內(nèi)膜容受性從而對植入效率的影響及可能的機制。
　　方法：采用貫序皮下注射雌、孕激素的方法建立子宮內(nèi)膜容受性小鼠模型;分別用實時定量 RT-PCR、Western-Blot、免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)和ELISA檢測8個與著床

2、相關(guān)因子的基因及蛋白表達水平;利用JAR滋養(yǎng)細(xì)胞和RL95-2上皮細(xì)胞株建立內(nèi)膜—滋養(yǎng)細(xì)胞相互作用的體外模型,觀察 JAR細(xì)胞球在經(jīng)過不同處理的單層內(nèi)膜上皮細(xì)胞(EEC)上的黏附和鋪展;小鼠胚泡移植實驗檢測外源性降鈣素對胚泡植入率的影響。
　　結(jié)果：(1)腹腔注射降鈣素可明顯提高容受期小鼠子宮內(nèi)膜中β3、HB-EGF和LIF的表達。(2)體外培養(yǎng)時100μM降鈣素可通過 PKC途經(jīng)促進 RL95-2細(xì)胞中β3和細(xì)胞膜表面αvβ3的

3、表達。(3)在細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)存在的情況下,降鈣素通過促進αvβ3進一步促進 RL95-2細(xì)胞中HB-EGF和LIF的表達。(4)在 JAR細(xì)胞球與RL95-2細(xì)胞共培養(yǎng)體系中,JAR細(xì)胞在經(jīng)降鈣素處理的EEC上的粘附率明顯大于未處理組;calphostin C預(yù)處理EEC,明顯抑制降鈣素對 JAR細(xì)胞球的黏附能力的促進作用。(5) JAR細(xì)胞在經(jīng)降鈣素處理的EEC上的鋪展擴大倍數(shù)明顯大于未處理組;在與 matrigel共同作用下,