七氟醚麻醉對(duì)發(fā)育期神經(jīng)系統(tǒng)損害的行為學(xué)觀察和甲基化調(diào)控研究.pdf

1、目的：許多研究表明哺乳動(dòng)物在發(fā)育關(guān)鍵期接受全身麻醉藥作用，會(huì)對(duì)發(fā)育期神經(jīng)系統(tǒng)和成年后認(rèn)知能力產(chǎn)生不良影響，但對(duì)其作用機(jī)制尚無(wú)定論。表觀遺傳學(xué)甲基化調(diào)控在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育，學(xué)習(xí)記憶等過(guò)程中均有重要作用。七氟醚是目前臨床小兒麻醉最常用的全麻藥之一，本文通過(guò)觀察出生后8天SD大鼠接受七氟醚麻醉后，成年期學(xué)習(xí)記憶能力改變和在不同時(shí)間點(diǎn)的杏仁核，海馬，皮層等各腦區(qū)DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的變化，探索七氟醚麻醉對(duì)發(fā)育期神經(jīng)系統(tǒng)可能的表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)機(jī)制。

2、　　 方法：取出生后8天SD大鼠幼仔，雌雄隨機(jī)，體重約20g左右，給予3％七氟醚復(fù)合70％氧氣麻醉4h；對(duì)照組在相同環(huán)境下暴露于空氣4h后返回原飼養(yǎng)籠中。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)只選擇兩組中雄性成年大鼠，于出生后8周進(jìn)行開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)，高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)，Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，場(chǎng)景性恐懼記憶實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其學(xué)習(xí)記憶能力，每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)用鼠每組8-14只。分子實(shí)驗(yàn)部分雌雄大鼠隨機(jī)，分別于麻醉結(jié)束后即刻，麻醉結(jié)束后2h，24h，1天，7天，28天，56天各時(shí)間點(diǎn)分離杏仁

3、核，海馬，皮層各腦組織，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)分析DNMT1，DNMT3a, NR1, NR2B, BDNF, Reelin各基因的mRNA表達(dá)水平，每組用鼠4-7只。另取兩組各7只大鼠，于麻醉結(jié)束后和暴露空氣結(jié)束后于開(kāi)胸直視下左心室取動(dòng)脈血進(jìn)行血?dú)夥治鰴z測(cè)七氟醚麻醉對(duì)動(dòng)物血氧，血糖水平的影響。
　　 結(jié)果：新生期接受七氟醚麻醉大鼠，成年后主要表現(xiàn)為海馬依賴(lài)的空間類(lèi)型整合能力和場(chǎng)景性恐懼記憶受損。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNMT）

4、變化也主要集中在海馬，表現(xiàn)為DNMT1在麻醉結(jié)束即刻顯著性降低，后恢復(fù)至與對(duì)照組相近水平；DNMT3a在麻醉后2h內(nèi)呈先升高后降低的雙向變化。NR2B基因表達(dá)水平在麻醉后24h顯著性升高；BDNF基因表達(dá)水平麻醉后2h，24h均顯著性降低。血?dú)夥治鼋Y(jié)果顯示，4h七氟醚麻醉對(duì)大鼠血氧含量，通氣狀況和血糖水平?jīng)]有顯著性影響。
　　 結(jié)論：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，新生大鼠接受七氟醚麻醉，可主要對(duì)成年后海馬依賴(lài)的空間整合，恐懼記憶能力造成損傷，而