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文檔簡介
1、目的:了解大連地區(qū)耐環(huán)丙沙星的大腸埃希菌中qnrA基因的流行情況和攜帶qnrA基因大腸埃希菌在環(huán)丙沙星壓力下gyrA基因突變及對防耐藥突變濃度(MPC)的影響方法:收集臨床分離的耐環(huán)丙沙星的大腸埃希菌213株,PCR法擴增qnrA基因,并測序。對qnrA基因陽性株,采用KB紙片擴散法檢測抗菌藥物的體外抗菌活性,雙紙片協(xié)同法觀察是否產生ESBLs。質粒結合試驗確定qnrA基因是否定位于質粒,通過傳代了解其穩(wěn)定性,對結合子用瓊脂稀釋法測MI
2、C。經PCR法和限制性內切酶酶切法證明結合子是否攜帶qnrA基因和gyrA基因發(fā)生突變與否。在不同濃度環(huán)丙沙星藥物濃度平皿上觀察gyrA基因突變及對防耐藥突變濃度的影響。 結果:213株菌中查到2株qnrA陽性菌株,測序結果與Genbank中qnrA基因比對吻合率達100%。其中一株產ESBLs對多種抗菌藥耐藥,另一株則比較敏感。質粒結合試驗一株成功。經傳代5次qnrA基因在結合子中比較穩(wěn)定。攜帶qnrA基因的菌株在藥物濃度的選
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