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文檔簡介
1、目的:
多發(fā)性骨髓瘤(Multiple Myeloma.MM)是一種漿細(xì)胞克隆性增殖的惡性疾病。本文探討多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株U266和多發(fā)性骨髓瘤患者骨髓單個核細(xì)胞(MM-BMMNC)中,干擾素調(diào)節(jié)因子8(ICSBP/IRF8)的表達(dá),同時通過測定DNA甲基化相關(guān)蛋白EZH2的含量以及探測ICSBP/IRF8啟動子序列CpG島甲基化程度從而推測DNA甲基化與ICSBP/IRF8表達(dá)異常以及多發(fā)性骨髓瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。
2、> 方法:
選取人類MM細(xì)胞株U266,10例MM患者提取骨髓單個核細(xì)胞(MM-BMMNC),10例正常人提取骨髓單個核細(xì)胞(N-BMMNC)。利用熒光定量PCR方法檢測ICSBP/IRF8的表達(dá)。利用western-blot方法檢測DNA甲基化相關(guān)蛋白EZH2的含量。利用甲基化特異性PCR方法檢測ICSBP/IRF8啟動子序列CpG島的甲基化程度。
結(jié)果:
與10例N-BMMNC相比,M
3、M細(xì)胞株U266和10例MM-BMMNC中ICSBP/IRF8表達(dá)低下,而EZH2含量明顯升高,且ICSBP/IRF8啟動序列CpG島甲基化程度明顯增高,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
結(jié)論:
本研究初步體外觀察了MM-BMMNC和U226細(xì)胞株中ICSBP/IRF8基因表達(dá)沉默,同時發(fā)現(xiàn)EZH2含量較正常明顯升高,且ICSBP/IRF8啟動序列CpG島甲基化程度較正常顯著增高。結(jié)果初步啟示,DNA甲
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