DKK1高表達與肝細胞癌不良預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、研究背景：肝細胞癌是世界十大惡性腫瘤之一。據(jù)國際癌癥中心(IARC)統(tǒng)計，全球肝癌年新發(fā)病例數(shù)已達到56.4萬人，死亡54.9萬人，其中半數(shù)以上發(fā)生在我國。肝癌已成為威脅我國和世界人民生命健康的重要兇手。Wnt信號通路是決定肝癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵信號通路，它在肝癌細胞的轉(zhuǎn)化、生長、遷移及凋亡過程中發(fā)揮著重要作用。DKK1是Wnt信號通路重要的調(diào)節(jié)因子，目前已發(fā)現(xiàn)在乳腺癌、肝母細胞瘤、非小細胞肺癌等多種腫瘤中表達上調(diào)。我們實驗室前期的基因芯片

2、結(jié)果表明DKK1 mRNA.在肝癌組織中的表達水平明顯高于癌旁組織，在結(jié)節(jié)性肝癌中的表達明顯高于孤立性大肝癌，提示DKK1的表達變化可能是肝細胞癌發(fā)生發(fā)展的重要分子機制。研究DKK1在肝細胞癌中的表達及其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系有利于進一步明確肝癌發(fā)生發(fā)展的機制和尋找肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的有效標志物及治療靶點。 目的：研究DKK1在肝細胞癌組織中mRNA及蛋白水平的表達情況，探討其與肝細胞癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系，為肝細胞癌的診斷及

3、治療提供新的靶點。 方法：新鮮標本取自中南大學(xué)湘雅醫(yī)院普外科2005年9月至2006年10月間30例肝癌手術(shù)患者的肝癌組織、癌旁肝組織以及5例肝血管瘤患者的正常肝臟組織。石蠟切片取自中南大學(xué)湘雅醫(yī)院普外科1998年6月至2006年S月間120例肝癌患者的手術(shù)切除標本。采用半定量逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈式反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測DKK1在肝癌組織、癌旁組織以及正常肝組織中的mRNA表達水平。采用免疫組化的方法(immunohistoc

4、hemistry)檢測120例肝癌標本切片中DKKl的蛋白表達水平及亞細胞定位。比較DKK1 mRNA及蛋白表達水平在肝癌組織、癌旁肝組織及正常肝組織的差異，及在不同類型肝癌結(jié)節(jié)性肝癌、孤立性大肝癌和小肝癌中的表達差異，并探討其與肝癌臨床病理特征之間的關(guān)系。通過臨床隨訪分析DKK1的蛋白表達水平與肝細胞癌患者術(shù)后無瘤生存時間及總生存時間的關(guān)系。 結(jié)果：RT-PCR結(jié)果顯示肝癌組織中DKK1 mRNA的表達水平明顯高于癌旁肝組織(

5、P<0.05)，而DKK 1 mRNA在癌旁肝組織和正常肝組織中的表達差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。DKK 1 mRNA表達水平在結(jié)節(jié)性肝癌中的表達水平明顯高于孤立性大肝癌和小肝癌(P<0.05)，而在孤立性肝癌及小肝癌間差異不明顯(P>0.05)。DKK1 mRNA的表達水平與肝癌患者有無靜脈浸潤密切相關(guān)(P<0.05)，而與患者性別、年齡、腫瘤直徑、有無肝硬化及包膜無關(guān)(P>0.05)。 免疫組化結(jié)果顯示DKK11蛋

6、白表達主要表達于胞漿。在120例標本石蠟切片中，其在肝癌組織中的表達水平高于癌旁肝組織P<0.05)。且DKK1蛋白在結(jié)節(jié)性肝癌的表達水平明顯高于孤立性大肝癌和小肝癌(P<0.05)，而在孤立性大肝癌及小肝癌間無顯著差異(P>0.05)。DKK1蛋白表達水平與肝癌患者結(jié)節(jié)數(shù)目、細胞分化、有無靜脈浸潤密切相關(guān)(P<0.05)，而與患者性別、年齡、腫瘤直徑、有無肝硬化及包膜無關(guān)(P>0.05)。DKK1蛋白高表達組生存時間及無瘤生存時間均明