急性髓系白血病和骨髓增生異常綜合征患者FANCF甲基化的研究.pdf

1、化療是急性髓系白血病(AML)的主要治療方法，但由于耐藥現(xiàn)象和藥物副反應的發(fā)生，使AML的治療成績不盡人意，有效的治療難治和復發(fā)的AML是目前急需解決的難題。骨髓增生異常綜合征(MDS)是一組異質(zhì)性克隆性惡性疾患，以高風險向急性白血病轉(zhuǎn)化為特征的疾病，目前尚無滿意的治療方法。 DNA甲基化導致的基因失活與突變或缺失不同，它不改變DNA序列，因此，DNA甲基化是一種可逆的改變，也是可操縱的，可能成為一種新的治療手段。DNA甲基化主

2、要指在CpG二核苷酸中胞嘧啶的5位碳原子上加上一個甲基基團，形成5-甲基胞嘧啶(5mC)。由于DNA甲基化影響基因突變、基因表達調(diào)控及基因組的穩(wěn)定性，因此與腫瘤的發(fā)生密切相關。 范可尼(FA)蛋白是存在于正常人體的蛋白基團，迄今已經(jīng)證明有11種FA互補基團和8種FA相關基因。FA基團的A、C、E、F、G 5個FA蛋白各有分工和作用，同時組成核型蛋白復合體并且可能通過FA-BRCA途徑直接參與DNA本身的修復和(或)破壞細胞周期檢

3、測點的信號通路。FANCF蛋白在FA基團中起到重要作用，F(xiàn)ANCF基因啟動子的甲基化導致了FANCF蛋白表達的缺失，從而導致FA-BRCA途徑的繼發(fā)性中斷。FA-BRCA完整通路的斷裂會導致DNA對外界不良因素刺激的修復功能減弱甚至喪失，從而誘導細胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細胞。已有研究證明FANCF基因的甲基化在卵巢癌，口腔癌，肺癌和宮頸癌的發(fā)生中起重要作用。但是此基因在AML和MDS中的研究國內(nèi)尚未有報道。本實驗擬通過探討FANCF基因的甲基化狀

4、態(tài)與AML和MDS發(fā)病、預后的關系，為其治療提供新的靶點。 材料與方法： 研究對象AML患者58例(初診38例，完全緩解20例)，中位年齡54歲，男女比例1.2：1；MDS患者18例，低危組(RA 5例、RAS 3例)共8例，高危組(RAEB 6例、RAEB-T 4例)共10例，中位年齡69歲，男女比例1:1；對照組20例，為缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血、腎性貧血或血小板減少性紫癜的患者。診斷均符合FAB診斷標準。

5、 方法：　　　　 采集骨髓的單個核細胞，抽提DNA，對DNA進行硫化修飾后用甲基化特異性PCR(MSP)檢測FANCF基因的甲基化狀態(tài)。結果用SPSS13.0統(tǒng)計軟件采用非參數(shù)檢驗中的Kruskal-Wallis秩和檢驗進行統(tǒng)計分析。 實驗結果： AML患者組FANCF基因表現(xiàn)出高甲基化，對比對照組的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；初診的AML患者甲基化程度高于完全緩解的AML患者，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P

6、<0.05)；完全緩解的AML患者與對照組比較，甲基化狀態(tài)的差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；MDS患者高危組和低危組均表現(xiàn)出高甲基化狀態(tài)，與對照組的差異有統(tǒng)計學意義(p<0.01)；MDS患者高危組甲基化程度高于低危組，兩組比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論： FANCF基因在AML和MDS患者中呈現(xiàn)高甲基化狀態(tài)，且初治的AML甲基化狀態(tài)高于完全緩解的AML，提示FANCF基因的高甲基化狀態(tài)可能在AML和MDS的