2005～2006年武漢地區(qū)A組輪狀病毒G和P基因型別的特征.pdf

1、輪狀病毒(Rotavirus，RV)屬于呼腸孤病毒科(Reoviridae)輪狀病毒屬，是引起嬰幼兒急性胃腸炎最常見的病毒病原，每年全世界因RV感染從而導(dǎo)致約1.25億嬰幼兒腹瀉和90萬嬰幼兒死亡，其中大多數(shù)發(fā)生在發(fā)展中國家。RV引起的腹瀉至今尚無特效藥物進(jìn)行治療，只能對癥進(jìn)行補液糾治，所以預(yù)防就顯得特別重要。而疫苗預(yù)防又是最有效的方法，因此發(fā)展RV疫苗成為當(dāng)今世界衛(wèi)生組織疫苗發(fā)展計劃的首要任務(wù)之一。RV的外殼結(jié)構(gòu)蛋白VP4、VP7具有

2、中和抗原活性，能刺激機體產(chǎn)生中和抗體，根據(jù)VP7、VP4蛋白的差異，RV可分為不同的G、P基因型。RV的基因型會隨著區(qū)域的不同而不同，即使同一區(qū)域的RV，其基因型會隨著時間的不同而不同。因此，為了研制合適的RV疫苗，必須開展對當(dāng)?shù)豏V基因型的監(jiān)測。本研究即對武漢地區(qū)2005～2006年的A組輪狀病毒的G、P基因型進(jìn)行分析，以期為輪狀病毒的防治及研制適合武漢地區(qū)的疫苗提供實驗依據(jù)。具體研究內(nèi)容如下： 第一節(jié)綜述了輪狀病毒的蛋白質(zhì)功

3、能，流行病學(xué)研究，臨床表現(xiàn)，主要血清型及變化，發(fā)病機理，治療和預(yù)防，實驗室診斷以及RV疫苗研究的現(xiàn)狀和展望。 第二節(jié)利用PAGE檢測了武漢地區(qū)收集的腹瀉兒童糞便標(biāo)本，初步分析了武漢地區(qū)腹瀉兒童中RV的區(qū)域，時間和人群分布；發(fā)現(xiàn)男女宿主間的發(fā)病率無顯著性差別，在不同年齡組的宿主中RV的陽性率存在明顯差異，6月～1歲年齡組的陽性率最高。 第三節(jié)利用多重RT-PCR對武漢地區(qū)2005～2006年A組輪狀病毒G基因型構(gòu)成進(jìn)行研究

4、，發(fā)現(xiàn)武漢地區(qū)A組輪狀病毒性腹瀉是以G3(66.2％)型為主，其次是G1(20.5％)型，G1/G3混合型占8％。 第四節(jié)利用多重巢式RT-PCR對武漢地區(qū)2005～2006年A組輪狀病毒P基因型構(gòu)成進(jìn)行研究，結(jié)果顯示武漢市A組輪狀病毒由P[4]、P[8]基因型構(gòu)成，以P[8]基因型為主，占94.35％，而P[4]僅占1.32％，未能P基因分型的占1.51％。 第五節(jié)分析武漢地區(qū)A組輪狀病毒G、P基因型組合，武漢地區(qū)20

5、05～2006年A組輪狀病毒G型和P型的組合是以G3P[8]、G1P[8]為主。與2002～2003年相比，G3P[8]型比率下降，從原來的80.79％降到66.2％；G1P[8]型比率上升，從1.32％升到20.5％。 第六節(jié)對部分未能G基因分型的GARV樣品，通過RT-PCR擴(kuò)增其vp7基因，對其序列進(jìn)行分析，首次在武漢發(fā)現(xiàn)G9型GARV。 第七節(jié)對部分未能P基因分型的GARV樣品，通過RT-PCR擴(kuò)增其vp4基因片

6、段，對其序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)與其它A組輪狀病毒P基因型有一定距離。 G3P[8]型比率下，G1P[8]型比率上升，提示我們，武漢地區(qū)的RV基因組成結(jié)構(gòu)有一定的改變；檢測到的G9型RV提示我們，武漢已經(jīng)開始有G9型的RV；而與其它A組輪狀病毒P基因型有一定距離的病毒株說明此病毒株的基因變異；這些結(jié)果提示我們，A組輪狀病毒VP7、VP4基因在自然狀態(tài)下已經(jīng)發(fā)生變異，隨著變異的加大，人群原來建立的抗體保護(hù)屏障對A組輪狀病毒的抵御作用將削弱，存在